1.一种快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、AuPB@Au 胶体的合成
取10mL纳米金胶溶液,加入10-20μL浓度为0.1mol/L的普鲁士蓝溶液作为拉曼信号分子,搅拌混合均匀后离心,重新悬浮于10mL超纯水中,得Au@PB胶体;往10mL的制备好的Au@PB胶体中加入250μL浓度为6*10-2 mol/L的柠檬酸钠溶液,磁力搅拌加热至沸腾后,加入
2.5mL浓度为1mmol/L氯金酸溶液后停止加热,继续磁力搅拌1h后,将胶体离心洗涤2次,重PB新分散于5mL超纯水中,得到Au @Au胶体;
S2、功能化AuPB@Au NPs的制备
将步骤S1制备好的AuPB@Au胶体与Fe(NTA)溶液按体积1:1混合后,搅拌混合后,离心洗涤除去未反应的Fe(NTA),去除上清液,重分散备用,即得功能化AuPB@Au NPs;
S3、将试纸条基材充分浸泡在3-巯丙基甲基二甲氧基硅烷乙醇溶液中,取出后用蒸馏水和无水乙醇分别进行漂洗,通过有机硅烷耦合作用在纸张纤维表面自组装形成一层单分子层,烘干备用即为功能化的试纸条;将其功能化的试纸条基材放入100mLG4的玻璃砂芯漏斗装置中,取50mL-100mL的制备好的功能化AuPB@Au NPs材料倒入均匀的砂芯漏斗装置中,抽滤,最后将滤纸取出干燥即为检测试纸条。
2.根据权利要求1所述的快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法,其特征在于,所述Fe(NTA)溶液的合成方法如下:首先取浓度为10−3 M的九水硝酸铁溶液和浓度为
10−3 M的氨三乙酸三钠溶液按体积1:1混合后,往溶液中添加pH调节剂调节Fe(NTA)溶液的pH 为7.0,混合液静置,得Fe(NTA)溶液。
3.根据权利要求1所述的快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法,其特征在于,所述纳米金胶溶液的制备方法如下:取100mL质量分数为0.01%的氯金酸溶液在磁力搅拌下加热至沸腾;然后取1-1.5 mL质量分数为1%柠檬酸钠溶液,加入到沸腾的上述氯金酸溶液中,待沸腾15min后,反应结束,冷却至室温,制成纳米金溶胶。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法,其特征在于:步骤S3中的试纸条基材为滤纸、玻璃纸、无纺布、纤维素膜或淀粉膜。
5.根据权利要求1所述的快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法,其特征在于:步骤S3中滤纸与3-巯丙基甲基二甲氧基硅烷乙醇溶液的浸泡时间为20-60min。
6.一种如权利要求1-5任一项所述方法制备的检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条。
7.一种利用权利要求6所述检测试纸条检测酪氨酸酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)制作标准比色卡:将不同浓度的酪氨酸酶标准溶液(500U/mL、400U/mL、300U/mL、
200U/mL、100U/mL、50U/mL、10U/mL、0U/mL)与多巴胺混合,依次滴加10μL在检测试纸条上,室温反应0.5-1.5分钟后晾干,记录检测试纸条颜色,根据不同颜色,整理得到酪氨酸酶标准比色卡;
2)检测酪氨酸酶:将待测样品与多巴胺混合后滴到检测试纸条上,室温反应0.5-1.5分钟后晾干,然后观察检测试纸条的颜色,并与步骤1)所得标准比色卡进行对照,通过颜色对比,估算出待测血清中的酪氨酸酶含量。
8.根据权利要求6所述的一种检测酪氨酸酶的方法,其特征在于:酪氨酸酶标准溶液的浓度为500U/mL、400U/mL、300U/mL、200U/mL、100U/mL、50U/mL、10U/mL和0U/mL;分别对应的比色卡的颜色分别为深红、酒红、紫红、淡紫红、淡紫、蓝紫、紫灰和灰色。
9.根据权利要求6所述的一种检测酪氨酸酶的方法,其特征在于:步骤1)中的多巴胺浓度为10-3M。