1.一种磁性固定化酵母细胞在不对称还原2‑氧代‑4‑苯基丁酸乙酯制备(R)‑2‑羟基‑
4‑苯基丁酸乙酯中的应用,其特征在于所述磁性固定化酵母细胞按如下方法制备:(1)将Fe3O4磁性颗粒与氨基酸水溶液超声分散后,使用外加磁场回收沉淀,沉淀洗涤后冻干,获得氨基酸修饰磁性纳米粒子;所述氨基酸为赖氨酸、精氨酸、谷氨酸或天冬氨酸;(2)将氨基酸修饰磁性纳米粒子与酵母细胞溶液混匀,20‑40℃、130‑170r/min摇床震荡中固定2‑6h,反应结束后,磁分离,沉淀用去离子水洗涤后冻干,获得磁性固定化酵母细胞;所述酵母细胞为安琪酵母股份有限公司的耐高糖百钻高活性干酵母。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于步骤(1)所述Fe3O4磁性纳米颗粒与氨基酸水溶液中氨基酸质量比为1:1;所述氨基酸水溶液质量浓度为1g/L。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于步骤(1)所述超声分散条件为:20~50KHz超声
30min。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于步骤(2)所述氨基酸修饰磁性纳米粒子与酵母细胞溶液中酵母细胞干重比为1:50‑300;所述酵母细胞溶液是将酵母细胞与pH 7磷酸缓冲液充分混匀制成,所述缓冲液添加量以酵母细胞干重计为20ml/3g。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于步骤(2)所述冻干条件为:‑80℃冰箱中预冻8h后,放入冷冻干燥机中冻干‑65℃真空干燥12h。
6.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的应用以2‑氧代‑4‑苯基丁酸乙酯乙醇溶液为底物,以pH9磷酸缓冲盐溶液为反应介质,以磁性固定化酵母细胞为催化剂构成转化体系,在20‑45℃、50‑250rpm条件下进行还原反应8~40h,反应液分离纯化,获得(R)‑2‑羟基‑
4‑苯基丁酸乙酯。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述底物浓度为0.1~0.5mmol/mL,所述底物与反应介质体积比为1:10;所述催化剂质量用量以缓冲液体积计为0.1‑0.5g/mL。
8.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述应用在交变磁场中进行分批还原反应,所述分批还原反应为:在磁场频率为500Hz、磁场强度为4‑20Gs的交变磁场中,将磁性固定化酵母细胞加入2‑氧代‑4‑苯基丁酸乙酯乙醇溶液中,在20‑45℃条件下进行还原反应,反应液分离纯化,获得(R)‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸乙酯。
9.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述应用在交变磁场中进行连续还原反应,所述连续还原反应为:在磁场频率为500Hz、磁场强度为4‑20Gs的交变磁场中,将磁性固定化酵母细胞加入连续流反应器中,以25‑500μL/min的速度流加2‑氧代‑4‑苯基丁酸乙酯乙醇溶液至磁性固定化酵母细胞中,同时以25‑500μL/min的速度将生成的产物回流加入底物中,在20‑45℃条件下进行连续还原反应,反应液分离纯化,获得(R)‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸乙酯。