1.一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述生物传感器由以下步骤制成:I. 使用免疫磁珠来选择性分离靶标;
II.将适体-触发器结合在靶标上,形成免疫磁珠/靶标/适体-触发器三明治结构;
III.固定在免疫磁珠表面上的适体-触发器在存在圆模板1和DNA聚合酶的情况下启动线性滚环扩增,生成线性滚环扩增的产物;
IV.GOD标记的辅助引物2和圆模板2与步骤III中的线性滚环扩增的产物结合,形成三元复合物,辅助引物2启动分支滚环扩增,生成分支产物;
V.GOD标记的辅助引物1和圆模板1与步骤IV中的分支产物结合,形成另一个三元复合物并启动二级分支滚环扩增,获得所述生物传感器。
2.根据权利要求1所述的一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述靶标为肿瘤标志物;所述DNA聚合酶为phi29-DNA聚合酶;所述GOD标记采用的交联剂为磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-甲酸。
3.根据权利要求1所述的一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述圆模板
1的核酸序列为SEQ ID NO.1、所述圆模板2的核酸序列为SEQ ID NO.2、所述适体的核酸序列为SEQ ID NO.3、所述触发器的核酸序列为SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5;所述辅助引物1的核酸序列为SEQ ID NO.6;所述辅助引物2的核酸序列为SEQ ID NO.7。
4.根据权利要求1所述的一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述辅助引物1和辅助引物2的5’端均经过巯基修饰。
5.根据权利要求1所述的一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述靶标为血小板衍生生长因子-BB。
6.如权利要求1-5任一项所述的检测肿瘤标志物的生物传感器的检测方法,包括以下步骤:A:将所述生物传感器置于含有pH指示剂和甲醇的葡萄糖溶液中孵育;
B:将孵育后的上清进行光谱扫描。
7.根据权利要6所述的检测肿瘤标志物的生物传感器的检测方法,其特征在于,所述步骤A中,所述PH指示剂为溴甲酚紫;所述葡萄糖溶液的浓度为250mM-1000 mM;所述甲醇的浓度为0-25‰;所述孵育的温度为25-45℃。
8.根据权利要7所述的检测肿瘤标志物的生物传感器的检测方法,其特征在于,所述葡萄糖溶液的浓度为500 mM;所述甲醇的浓度为5‰;所述孵育的温度为37℃。
9.根据权利要6所述的检测肿瘤标志物的生物传感器的检测方法,其特征在于,所述步骤B中,所述光谱扫描的参数为:光谱范围在350nm至700nm之间,以2nm的间隔进行光谱扫描,并测量在590nm和430nm处的相应吸光度。
10.如权利要1-5任一项所述的检测肿瘤标志物的生物传感器在制备检测肿瘤的试剂盒中的应用。