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专利号: 2014105430561
申请人: 电子科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-01
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种可用于肿瘤标志物检测的光电两用生物传感器的制作方法,其特征在于它包括在ITO衬底沉积一薄层稳定的金膜,在金膜上固定能特异性识别肿瘤标志物的抗体/纳米金复合物膜,再把待检测肿瘤标志物结合到抗体/纳米金复合物膜上,采用如下方式在ITO金膜上固定能特异性识别肿瘤标志物的抗体/纳米金复合物膜,具体的,它是在24孔板的每个孔中加入1ml-2ml能特异性识别肿瘤标志物的抗体/纳米金复合物溶液,并在每孔溶液中放入1片金膜没有脱落的ITO玻片,盖上24孔板盖板放到在4℃冰箱中孵育48小时,孵育完成后取出玻片用PBS清洗备用。

2.根据权利要求1所述的一种可用于肿瘤标志物检测的光电两用生物传感器的制作方法,其特征在于:在ITO衬底沉积一薄层稳定的金膜时,它直接将清洗好的ITO导电玻璃置于装有金靶的小型离子溅射仪样品台上,溅射一定的时间得到一薄层金膜。

3.根据权利要求1所述的一种可用于肿瘤标志物检测的光电两用生物传感器的制作方法,其特征在于:在ITO衬底沉积一薄层稳定的金膜时,它直接将沉积一薄层金膜ITO玻片浸入二次蒸馏水中半小时来检测所沉积金膜的稳定性。

4.根据权利要求1所述的一种可用于肿瘤标志物检测的光电两用生物传感器的制作方法,其特征在于:所述能特异性识别肿瘤标志物的抗体/纳米金复合物溶液的制备方法:它需要一定量纳米金粒子溶液,用Na2CO3调pH值,加入一定量的CEA抗体,摇匀后,迅速加入一定量聚乙二醇(PEG)溶液,在常温下放置2-3h,在低温下高速离心10-30min,再吸去上清液,在沉淀中加入中性的磷酸盐缓冲溶液(PBS),除去未结合的抗体和PEG,重复操作2-3次后,将样品溶于一定量聚乙二醇的叠氮钠溶液,于4℃冰箱中冷藏保存备用。

5.根据权利要求4所述的一种可用于肿瘤标志物检测的光电两用生物传感器的制作方法,其特征在于,所述纳米金粒子溶液采用如下制备方法:它的制备需要取一定量的氯金酸水溶液,加热至沸腾搅动下加入一定量的柠檬酸三钠溶液,继续煮沸一段时间,冷却后以蒸馏水恢复到原来的体积,置于冰箱保存备用。

6.根据权利要求1所述的一种可用于肿瘤标志物检测的光电两用生物传感器的制作方法,其特征在于,把待检测肿瘤标志物结合到抗体/纳米金复合物膜上采用如下所述的方法实现,它包含以下步骤:(1)需要取6个10ml清洗干净的小烧杯,分别贴上标签1,2,3,4,5,6;然后在6个小烧杯中依次加入一定体积不同浓度的肿瘤标志物样品,随即加入一定量的酶标记物溶液,混匀后在每个小烧杯中加入1片固定有抗体/纳米金复合物的敷金ITO导电玻璃;

(2)需要把步骤(1)中溶液已混匀的6个小烧杯置于37℃干燥箱中温育60分钟;

(3)需要依次取出6个小烧杯中的ITO玻片,用磷酸盐缓冲液充分洗涤后放在滤纸上干燥;

(4)需要再取6个10ml清洗干净的小烧杯,分别在6个小烧杯中依次的加入50μl底物和

50μl显色剂,混匀后依次在6个小烧杯中放入步骤(3)中得到的ITO玻片,并让体系在避光条件下反应5-10分钟;

(5)需要在步骤(4)的小烧杯中分别加入50μl一定浓度的硫酸溶液终止步骤(4)的反应,依次取出在步骤(4)中6个小烧杯中得到的玻片,用PBS溶液清洗后放在滤纸上干燥,放入四个小滤纸袋中便于携带,纸袋上标记好,置于4℃冰箱中保存。