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专利号: 2020101008699
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种脂肪酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列是(1)或(2):(1)SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列;

(2)在SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的基础上,经修饰、缺失或添加一或多个氨基酸获得的同源性90%及以上的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述脂肪酶突变体的基因。

3.含权利要求2所述基因的载体。

4.如权利要求3所述的载体,其特征在于,所述载体包括pPICZαA。

5.表达权利要求1所述脂肪酶突变体的细胞。

6.如权利要求5所述的细胞,其特征在于,所述细胞的宿主包括毕赤酵母。

7.一种同时提高脂肪酶的最适反应温度、活性和热稳定性的方法,其特征在于,将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的脂肪酶亲本酶的第146位氨基酸由丙氨酸突变为甘氨酸,第

278位氨基酸由亮氨酸突变为甲硫氨酸。

8.一种同时提高脂肪酶的最适反应温度、活性和热稳定性的方法,其特征在于,将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的脂肪酶亲本酶的第146位氨基酸由丙氨酸突变为甘氨酸,第

278位氨基酸由亮氨酸突变为甲硫氨酸,第151位氨基酸由丙氨酸突变为脯氨酸。

9.一种制备权利要求1所述脂肪酶突变体的方法,其特征在于,将OD600达到2~6的含权利要求5所述的细胞的菌体转移至BMMY培养基,加入甲醇诱导,26~30℃,200~220rpm摇床培养。

10.权利要求1所述的脂肪酶突变体在食品、制药、生物能源或化工领域的应用。