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专利号: 202010009417X
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种磷脂酶D突变体,其特征在于,所述突变体是通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的磷脂酶D第357位和第405位的氨基酸中的一个或两个位点进行突变获得的。

2.根据权利要求1所述突变体,其特征在于,将如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列第357位氨基酸残基突变为苯丙氨酸;或将如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列第405位氨基酸残基突变为丙氨酸;或将如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列第357位和第405位氨基酸残基分别突变为苯丙氨酸和丙氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.权利要求1~2任一所述突变体的制备方法,其特征在于,根据突变位点,设计定点突变的突变引物,以携带磷脂酶D酶基因的载体为模板进行定点突变,得到含编码突变体的基因的质粒载体;将含编码突变体的基因的质粒载体转化进宿主细胞,得到表达编码突变体的基因的宿主细胞;将表达编码突变体的基因的宿主细胞进行发酵培养、诱导,获得磷脂酶D突变体。

5.携带权利要求3所述基因的载体或宿主细胞。

6.一种磷酯酰丝氨酸的制备方法,其特征在于,所述方法是将权利要求5所述的携带权利要求3所述基因的宿主细胞添加至含有大豆卵磷脂和L-丝氨酸的反应体系中进行过反应,获得含磷酯酰丝氨酸的反应液;将含磷酯酰丝氨酸的反应液进行提取,获得磷酯酰丝氨酸。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述大豆卵磷脂在反应体系中的浓度为

0.02~0.4mol/L,L-丝氨酸在反应体系中的浓度为0.2~2.0mol/L。

8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述携带权利要求3所述基因的宿主细胞在反应体系中的浓度为1g/L~100g/L。

9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述反应条件为30~60℃、150~250rpm、反应2~8h。

10.权利要求1~2任一所述突变体在磷脂酰丝氨酸制备中的应用。