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专利号: 201710594567X
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种高产磷脂酶D的基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主,表达磷脂酶D;所述磷脂酶D的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述磷脂酶D由pET系列载体进行表达。

3.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述大肠杆菌包括E.coli BL21、E.coli JM109、E.coli DH5α或E.coli TOP10。

4.一种构建权利要求1所述高产磷脂酶D的基因工程菌的方法,其特征在于,将编码磷脂酶D的基因与载体连接,在宿主大肠杆菌中重组表达;所述编码磷脂酶D的基因序列如SEQ ID NO.2所示。

5.权利要求4所述的方法,其特征在于,所述载体为pET28a(+),所述大肠杆菌为E.coli BL21(DE3)。

6.一种重组磷脂酶D的制备方法,其特征在于,将权利要求1所述的基因工程菌培养至OD600为0.6-1.0,以IPTG为诱导剂,表达磷脂酶D。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,将权利要求1所述的基因工程菌培养至OD600为0.6-1.0,加入终浓度为0.4~0.6mM IPTG,于25~28℃诱导1~4h。

8.一种生产磷脂酰丝氨酸的方法,其特征在于,所述方法是以大豆卵磷脂和L-丝氨酸为底物,应用权利要求1所述的基因工程菌转化底物生产磷脂酰丝氨酸。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述转化体系是:大豆卵磷脂浓度为0.1~

0.4mol,L-丝氨酸浓度为0.5~2.0mol,转化条件为:pH 4~9,转化温度30~60℃,转化时间

2~8h。

10.权利要求1所述的基因工程菌在制备含磷脂酰丝氨酸的食品、药品或保健品中的应用。