1.一种产L‑半胱氨酸的基因工程菌，由如下方法构建获得：(1)以菌株E.coli  CCTCC NO：M 2019108为底盘菌株，将其基因组中的pgk基因的启动子替换为trc启动子，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk)；

(2)将E coli W3110 EY(trc‑pgk)基因组中cycA基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA)；

(3)将E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA)基因组中gpmA、pykF基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF)；

(4)将E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF)基因组中的poxB基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB)；

(5)将E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB)基因组中的metR基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB△metR)；

(6)将E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB△metR)基因组中的cysB替换成鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium的cysB并将149位的苏氨酸突变成脯氨酸T149P

(T149P)，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmAΔpykF△poxB△metR:cysB )；

(7)在质粒上过表达谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum的serC，然后转化到E T149P

coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB△metR:cysB )中得到E coli T149P

W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB△metR:cysB )/pC glu serC，即为所述产L‑半胱氨酸的基因工程菌。

2.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于所述菌株为大肠杆菌W3110 EYC glu serC(Escherichia coli  W3110 EYC glu serC)，保存于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉武汉大学，邮编：430072，保藏日期：2019年12月9日，保藏编号：CCTCC NO：M 20191026。

3.构建权利要求1所述基因工程菌的方法，所述方法包括：(1)以菌株E.coli W3110 CCTCC NO：M 2019108为底盘菌株，应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将其基因组中的gk基因的启动子替换为trc启动子，得到E coli W3110 EY(trc‑pgk)；

(2)应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将E coli W3110 EY(trc‑pgk)基因组中cycA基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgkΔcycA)；

(3)应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将E coli  W3110 EY(trc‑pgkΔcycA)基因组中gpmA、pykF基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykF)；

(4)应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将E coli  W3110 EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykF)基因组中的poxB基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykFΔpoxB)；

(5)应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将E coli W3110 EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykFΔpoxB)基因组中的metR基因敲除，得到E coli W3110 EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykFΔpoxBΔmetR)；

(6)应用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将E coli W3110 EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykFΔpoxBΔmetR)基因组中的cysB替换成鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium的cysB并将149位的苏氨酸突变成脯氨酸，得到E coli W3110EY(trc‑pgkΔcycAΔgpmAΔpykFΔT149P

poxBΔmetR:cysB )；

(7)在质粒上过表达谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum的serC，然后转化到E T149P

coli W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB△metR:cysB )中得到E coli T149P

W3110 EY(trc‑pgk△cycA△gpmA△pykF△poxB△metR:cysB )/pC glu serC，即为所述产L‑半胱氨酸的基因工程菌。

4.权利要求1或2所述基因工程菌在微生物发酵制备L‑半胱氨酸中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述应用为：将所述基因工程菌菌株接种至含有Amp的发酵培养基中，25～30℃、180～200rpm条件下进行发酵培养OD600＝0.8～1.0时，添加终浓度为0.1mM的IPTG，继续培养至48h，发酵结束后取发酵液上清分离纯化得到L‑半胱氨酸。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述发酵培养基组成如下：葡萄糖20g/L、(NH4)2SO4 16g/L、KH2PO4 1g/L、Na2S2O3 2g/L、酵母提取物2g/L、CaCO3 10g/L，1ml/L微量元素溶液，溶剂为去离子水，pH值自然；微量元素溶液组成为：0.15g/L Na2MoO4·2H2O,2.5g/L H3BO3,0.7g/LCoCl2·6H2O,0.25g/L CuSO4·5H2O,1.6g/L MnCl2·4H2O,0.3g/L ZnSO4·

7H2O，溶剂为去离子水。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述基因工程菌发酵前，先接种至LB培养基中，于温度37℃、转速200rpm的摇床上过夜培养，然后以体积浓度5％接种量接种到发酵培养基中培养。