1.一种恩度体内控释药物,其特征在于:所述控释药物采用红细胞包载恩度;所述红细
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胞表面修饰葡萄糖氧化酶;所述恩度的包载浓度为21.23±0.46U/10 cells;所述恩度体内控释药物通过以下步骤制备:(1)红细胞包载恩度:采用低渗‑电穿孔法进行红细胞包载恩度,获得载药红细胞;
(2)生物素化葡萄糖氧化酶:生物素对葡萄糖氧化酶进行修饰;
(3)葡萄糖氧化酶修饰:将生物素化的葡萄糖氧化酶修饰在步骤(1)制备得到的载药红细胞表面。
2.根据权利要求1所述的恩度体内控释药物,其特征在于:所述红细胞表面修饰的葡萄
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糖氧化酶的浓度为0.17±0.04mg/10 cells。
3.根据权利要求1所述的恩度体内控释药物,其特征在于:所述步骤(1)低渗‑电穿孔法进行红细胞包载恩度包括以下步骤:a、低渗:将红细胞离心,并在含有恩度的低渗溶液中重悬;低渗处理条件为:4℃下处理
1‑3小时;所述低渗溶液中恩度的浓度为5.0mg/mL;
b、电穿孔:将步骤a中处理后的红细胞于脉冲电压1200V,脉宽0.01ms下脉冲处理3次,每次10s;
c、高渗:将电穿孔后的载药红细胞离心,重悬于高渗溶液中,在37℃下放置30‑60分钟;
d、等渗:在PBS缓冲液中洗涤两次以除去未包封的恩度,即得所述载药红细胞。
4.根据权利要求3所述的恩度体内控释药物,其特征在于:所述步骤a中处理时间为3小时。
5.根据权利要求4所述的恩度体内控释药物,其特征在于:所述步骤a中的低渗溶液采用15mM NaH2PO4·2H2O,15mM NaHCO3,2mM ATP,3mM还原型谷胱甘肽,20mM葡萄糖,5mM NaCl,72mOsm/Kg;所述步骤c中的高渗溶液采用12.5mM葡萄糖,250mM NaCl,12.5mM NaH2PO4·2H2O,12.5mM丙酮酸钠,12.5mM肌酐,0.63mM腺嘌呤,550mOsm/Kg,pH 8。
6.根据权利要求1所述的恩度体内控释药物,其特征在于:所述步骤(2)中生物素化葡萄糖氧化酶制备过程为:将10mg生物素溶解于1mL二甲基甲酰胺中,然后加入5mL浓度为
10mg/mL的葡萄糖氧化酶溶液及N,N'‑羰基二咪唑,室温条件下搅拌1小时;然后,将溶液放到14kDa透析袋中,常温透析24小时;检测葡萄糖氧化酶浓度,并调整至4mg/mL。
7.根据权利要求1所述的恩度体内控释药物,其特征在于:所述步骤(3)中生物素化的葡萄糖氧化酶修饰的具体步骤为:将步骤(2)处理后的生物素化葡萄糖氧化酶与经过步骤(1)预处理后的载药红细胞混合均匀,4℃,2小时;生物素化葡萄糖氧化酶与载药红细胞混
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合比例为0.5mg/10 cells。
8.权利要求1或2所述恩度体内控释药物在制备治疗肿瘤药物方面的应用。