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专利号: 2019111666593
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种基因工程菌,其特征在于,在大肠杆菌染色体的一个或多个位点上整合一个或多个拷贝数的氨基酸氧化酶基因;所述染色体的一个或多个位点包括:dkgB、eaeH、lysO、bluF、tam、glsB、rcs、mntH、nupG、pitB、rbsA或pgi中的至少一处。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,将氨基酸氧化酶基因进行多拷贝整合;所述多拷贝的数量为6~30个拷贝。

3.根据权利要求1或2所述的基因工程菌,其特征在于,所述L-氨基酸氧化酶为来自Proteus mirabilis ATCC 29906的L-氨基酸氧化酶、来自Cosenzaea myxofaciens ATCC 

19692的L-氨基酸氧化酶、来自Morganella morganii ATCC 49993的L-氨基酸氧化酶、来自Providencia rettgeri DSM 1131的L-氨基酸氧化酶或Ignatzschineria larvae DSM 

13226中的L-氨基酸氧化酶。

4.根据权利要求1~3任一所述的基因工程菌,其特征在于,所述大肠杆菌的宿主为E.coliBL21、E.coli JM109、E.coli DH5α或E.coli Top10。

5.根据权利要求1~4任一所述的基因工程菌,其特征在于,还表达氨基酸氧化酶参与的代谢途径中相关的基因。

6.根据权利要求5所述的基因工程菌,其特征在于,通过pET20B、pColdII、pETDuet-1或pACYCDuet-1表达所述相关的基因。

7.一种构建权利要求1~4任一所述基因工程菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)构建氨基酸氧化酶基因整合框;所述整合框为:整合位点左臂-氨基酸氧化酶基因-整合位点右臂;所述整合位点包括dkgB、eaeH、lysO、bluF、tam、glsB、rcs、mntH、nupG、pitB、rbsA或pgi。

(2)是步骤(1)构建的氨基酸氧化酶基因整合框转化至大肠杆菌电转感受态细胞中;所述大肠杆菌为E.coli BL21、E.coli JM109、E.coli DH5α或E.coli Top10。

8.一种全细胞催化剂,其特征在于,含有权利要求1~6任一所述的基因工程菌细胞;所述细胞是接种于培养基中,于22~30℃培养≥16h后获得。

9.一种生产酮酸的方法,其特征在于,以L型氨基酸为底物,应用权利要求8所述的全细胞催化剂进行微生物转化。

10.权利要求1~6任一所述基因工程菌在食品、生物领域参与氨基酸脱氢反应中的应用。