1.一种弓形虫Actin蛋白的表位多克隆抗体,其特征在于:
是以弓形虫Actin氨基酸序列中C端227-237为特异性较好的抗原决定簇肽段,获得弓形虫抗原决定簇多肽,进而制备的弓形虫Actin蛋白的表位多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的弓形虫Actin蛋白的表位多克隆抗体,其特征在于是通过包括如下步骤的方法制备获得:步骤1:通过分析弓形虫Actin氨基酸序列中的抗原表位,与人、小鼠、猴、鸡等物种的Actin氨基酸序列做同源性比对,确定C端227-237为特异性较好的抗原决定簇肽段,再在序列前加一个半胱氨酸C,偶联KLH,获得弓形虫抗原决定簇多肽;
步骤2:将1mg弓形虫抗原决定簇多肽溶于1mlpH值7.4的无菌PBS缓冲液中,制备多肽溶液;取1ml多肽溶液加入2.5ml无菌注射针筒中,再加入1ml弗氏完全佐剂,于冰上反复推拉
30min进行乳化,直至形成油包水滴;取两只2-2.5kg的新西兰白兔,皮下免疫400μg/次,2-3周免疫一次,免疫3-4次后,采血检测,通过间接ELISA方法确定抗血清针对多肽的效价,待效价大于1:50000进行最终采血制备抗血清;
步骤3:采用Protein G纯化,将步骤2所得抗血清与pH值7.4的PBS缓冲液等量混合后缓慢上样,待抗体结合后用pH值7.4的甘氨酸缓冲液洗脱,即得到纯化抗体。
3.根据权利要求2所述的弓形虫Actin蛋白的表位多克隆抗体,其特征在于:步骤1中,所述弓形虫抗原决定簇多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
4.权利要求1、2或3所述的弓形虫肌动蛋白Actin的表位多克隆抗体的应用,其特征在于:所述弓形虫肌动蛋白Actin的表位多克隆抗体在特异性检测识别弓形虫Actin蛋白的过程中作为检测试剂使用。