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专利号: 2019103089202
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种小肽,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的第1至73位。

2.根据权利要求1所述的小肽,其特征在于,所述小肽由基因AtPDF2.5密码子编码的氨基酸通过肽链连接得到,所述基因AtPDF2.5的基因序列如SEQ ID NO:1所示。

3.一种如权利要求1或2所述的小肽在提高酵母镉抗性中的应用,其特征在于,所述应用的操作方法包括如下步骤:将所述小肽的编码基因AtPDF2.5通过PCR法扩增,然后通过同源重组的方法克隆至酵母表达载体PYES2中,得到含有基因AtPDF2.5的目标载体,再通过PEG/醋酸锂法把所述目标载体转化至酵母的镉敏感突变体Δyap1中进行异源过表达,即得到含有所述小肽的镉耐受酵母。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述PCR法扩增采用的引物为Ye-AtPDF2.5,其正向引物如SEQ ID NO:3所示,其反向引物如SEQ ID NO:4所示。

5.一种如权利要求1或2所述的小肽在提高植物镉抗性和镉积累中的应用,其特征在于,所述应用的操作方法包括如下步骤:将所述小肽的编码基因AtPDF2.5通过PCR法扩增,然后通过同源重组的方法克隆至植物表达载体P1300中,得到含有基因AtPDF2.5的目标载体,再将所述目标载体通过热击转化法转入农杆菌中,最终通过花序浸染法转化到植物中进行过表达,即得到含有所述小肽的镉耐受植物。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述PCR法扩增采用的引物为OE-AtPDF2.5,其正向引物如SEQ ID NO:7所示,其反向引物如SEQ ID NO:8所示。

7.一种小肽,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的第27至73位。

8.根据权利要求7所述的小肽,其特征在于,所述小肽由基因ΔSPAtPDF2.5的密码子编码的氨基酸通过肽链连接得到,所述基因ΔSPAtPDF2.5的基因序列如SEQ ID NO:1的第79位至第222位所示。

9.一种如权利要求7或8所述的小肽在提高大肠杆菌镉螯合活性中的应用,其特征在于,所述应用的操作方法包括如下步骤:将所述小肽的编码基因ΔSPAtPDF2.5通过PCR法扩增,然后通过同源重组的方法克隆至蛋白表达载体PCold-TF中,得到含有基因ΔSPAtPDF2.5的目标载体,再将所述目标载体通过热击转化法转入大肠杆菌中进行原核表达,即得到具有镉螯合活性的原核表达蛋白。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述PCR法扩增采用的引物为TF-AtPDF2.5,其正向引物如SEQ ID NO:5所示,其反向引物如SEQ ID NO:6所示。