1.一种基于金钯纳米花/石墨烯复合材料的组蛋白乙酰转移酶计时‑电流传感器AbAc‑AuPd@GO/peptide/Au的应用,其特征在于,应用方法如下:(1)乙酰基抗体‑金钯纳米花/石墨烯复合材料AbAc‑AuPd@GO的制备将0.1~1g石墨烯GO分散在10~30mL去离子水超声0.1~1h,再加入1~5mL 0.1~3g/L的氯金酸HAuCl4溶液和1~5mL 0.1~3g/L的氯钯酸H2PdCl4溶液,磁力均匀搅拌0.1~1h,置于氙弧灯下照射0.1~1h,再转入干燥箱中,30~100℃反应10~36h;最后,将样本置于氢气管式炉中100~500℃反应0.5~5h,将制备的AuPd@GO分散在去离子水中得到0.1~5mg/mL的AuPd@GO分散液,备用;
取1~300μL 0.1~5g/L乙酰基抗体AbAc置于氦氖激光治疗仪中照射5~60s,再添加到
0.1~3mL上述AuPd@GO分散液中,30~42℃反应1~8h;
(2)组蛋白乙酰转移酶计时‑电流传感器的制备a.金电极Au
金电极Au使用前分别用直径为0.1~0.5μm和0.01~0.1μm的Al2O3粉末进行打磨,利用超纯水通过超声清洗1~5次,之后置于氮气流中干燥,再将其浸泡于0.01~0.5M H2SO4溶液中,在‑0.3V~+1.2V范围内进行循环伏安扫描5~30min,最后再经超纯水清洗后氮气吹干备用;
b.peptide/Au
将5~20μL 0.01~1mM底物多肽peptide滴涂于处理好的Au表面反应1~8h,通过Au‑S键固定的底物多肽自组装单分子层,随后蒸馏水缓缓冲洗电极,再滴涂5~20μL组蛋白乙酰转移酶反应液,将电极置于25~37℃恒温箱中孵育30~120min;
其中所述组蛋白乙酰转移酶反应液组成为HAT p300与乙酰辅酶A在磷酸缓冲溶液PBS中充分混合;并且其中,HAT p300浓度为200~1000nM,用量为1~5μL;乙酰辅酶A浓度为1~
5mM,用量为1~5μL;
c.AbAc‑AuPd@GO/peptide/Au取(1)中制备的AbAc‑AuPd@GO溶液2~12μL滴涂于peptide/Au电极上,30~42℃下静置
10~60min,随后蒸馏水缓缓冲洗电极,之后用于计时‑电流检测,即获得所述基于金钯纳米花/石墨烯复合材料的组蛋白乙酰转移酶计时‑电流传感器;将制备好的电极置于含有双氧水的电解质溶液中,出现明显的电化学催化信号;在电极制备过程的乙酰化反应过程中,随着HATp300浓度变大,被乙酰化的底物多肽变多,通过乙酰基和乙酰基抗体的特异性结合作用,增加乙酰基抗体‑金钯纳米花/石墨烯复合材料的负载量;电流的大小与目标物HATp300的浓度在一定范围内呈线性关系,实现不同浓度HAT p300的检测。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,HAT p300的检测限低至0.37pM。