1.一种基于DNA纳米管的电化学发光生物传感器,其特征是:利用DNA纳米管放大信号技术,设计了电化学发光生物传感器,通过“on-off”检测模式,实现了对甲基化酶和黄曲霉素的灵敏分析。目标甲基化酶引发了发夹DNA的甲基化和剪切反应,将Ru(phen)32+标记的纳米管组装到电极上,实现了甲基化酶的电化学发光检测。进一步利用纳米管上的适体结合目标黄曲霉素,纳米管结构破坏释放出信号探针,对黄曲霉素进行ECL检测。
2.一种制备权利要求1所述的基于DNA纳米管的电化学发光生物传感器的方法和应用,其特征方法由下列步骤组成:
2+
步骤1.DNA纳米管-Ru(phen)3 探针的制备:三种DNA单链S1,S2和S3溶于TE缓冲溶液中,从95℃到室温进行退火反应,组装DNA纳米管。取50μL纳米管溶液与Ru(phen)32+(100μL,
2mM)在37℃下温育7小时。
步骤2.ECL生物传感器的制备及目标检测:将金电极用α-Al2O3粉磨光,用纯水冲洗并用氮气吹干,在0.5M H2SO4溶液中,进行电化学扫描,得到完整的循环伏安峰,冲洗干净。取20μL金胶滴加在电极表面,自然晾干。将10μL发夹DNA(1.0μM)滴在电极表面室温过夜,然后用
1mM MCH反应1小时。接着将不同浓度的甲基化酶、剪切酶以及DNA纳米管-Ru(phen)32+信号探针顺序滴在电极表面反应2小时。再将不同浓度的黄曲霉素滴到电极表面,37℃下反应3小时。然后用PBS溶液冲洗电极。在200mM,pH 7.4含有20mM TPA的缓冲溶液中进行ECL信号检测。