1.一种脂肪间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取脂肪组织,酶解消化、培养得脂肪间充质干细胞;
(2)传代3~5次,即至P3~P5代后,置于低氧环境中培养1~3h,并对细胞进行机械牵拉;
(3)恢复正常氧气浓度,继续培养;
(4)收集细胞上清液,超滤透析,收集截留液,即得脂肪间充质干细胞因子。
2.根据权利要求1所述的脂肪间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述的置于低氧环境中培养为:于氧气浓度为(5±0.5)%的条件下培养。
3.根据权利要求1所述的脂肪间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,所述对细胞进行机械牵拉的方法为:传代时将细胞转移至机械牵拉细胞培养盒中,细胞贴壁附着于机械牵拉细胞培养盒的弹性膜上生长;所述机械牵拉包括:一次将弹性膜拉长10%~20%。
4.根据权利要求1~3任一项所述的脂肪间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述的酶解消化为:采用含有EDTA-Tripsin与蛋白酶的复合酶溶液,于37℃消化2~4h。
5.根据权利要求1~3任一项所述的脂肪间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,步骤(4)所述的超滤透析为:通过30~50KD的超滤膜进行超滤透析,取透析液;再将透析液通过90~110D超滤膜,收集截流液。
6.一种脂肪间充质干细胞因子冻干粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将如权利要求1~5任一项所述制备得到的脂肪间充质干细胞因子的浓缩液,加入冻干保护剂,冻干,即得。
7.根据权利要求6所述的脂肪间充质干细胞因子冻干粉的制备方法,其特征在于,所述加入冻干保护剂为:每100mL所述脂肪间充质干细胞因子的浓缩液中,加入以下组分:2~7g聚乙二醇、1~5g魔芋糖、0.1~1g脯氨酸、0.5~1.5g谷胱甘肽、0.01~0.05g苯甲酸钠、0.1~0.5g十二烷基磺酸钠、0.2~0.8g四氢嘧啶。
8.根据权利要求6或7所述的脂肪间充质干细胞因子冻干粉的制备方法,其特征在于,所述冻干的条件为:以9~11℃/min的速度降至-60~-45℃,维持冷冻1~3小时;后置于真空冷冻干燥机中于压强10~50Pa,温度-38~35℃的条件下冻干20~48h。
9.一种脂肪间充质干细胞因子冻干粉,其特征在于,如权利要求6~8任一项所述的制备方法制备得到。
10.如权利要求9所述的脂肪间充质干细胞因子冻干粉在制备促进伤口愈合的药物或医用材料中的应用。