1.一种多粘菌素B磁珠的制备方法,其特征在于,包括:对多粘菌素B进行预处理,预处理过程为:将氯甲酸苄酯、乙醚、NaHCO3溶液共同混合在二氯甲烷中,制备反应液;将反应液与多粘菌素B混合,在25 40℃、300 500r/min下搅拌2 4h,分离,获得初步预处理的多粘菌素B;
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将赖氨酸溶于柠檬酸和柠檬酸钠的混合液中,混合液的pH=4.8 6.6,再加入DCC和~
DMAP,室温、200 500r/min下搅拌10 30min,得到活化后的赖氨酸;
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将活化后的赖氨酸加入到初步预处理的多粘菌素B的溶液中,室温、100 500r/min下搅~
拌0.5 3h,得到预处理后的多粘菌素B;
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将表面经过羧基改性的Fe3O4纳米磁珠与预处理后的多粘菌素B溶液混合后,再加入NHS和EDC,在40~60℃下搅拌2~5h,得到表面包覆多粘菌素B的Fe3O4纳米磁珠;
将三甲基碘硅烷溶液混合到表面包覆多粘菌素B的Fe3O4纳米磁珠的去离子水溶液中,室温、50~200r/min下搅拌2~5h,其中,三甲基碘硅烷溶液的体积与Fe3O4纳米磁珠的质量比为2 5:0.5 1,质量的单位为g,体积的单位为ml;
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最后用饱和氯化钠溶液洗涤至上清液澄清,磁分离,得到多粘菌素B磁珠。
2.如权利要求1所述的多粘菌素B磁珠的制备方法,其特征在于,所述的多粘菌素B与氯甲酸苄酯的质量比为3:2;
氯甲酸苄酯的质量:NaHCO3的质量:乙醚的体积=1:0.5~1:0.5~2.5,其中,质量的单位为g,体积的单位为ml;
所述的赖氨酸、DCC和DMAP的质量比为1:2:0.5;
所述的活化后的赖氨酸和初步预处理后的多粘菌素B的质量比为1.25:1。
3.如权利要求1所述的多粘菌素B磁珠的制备方法,其特征在于,初步预处理的多粘菌素B的分离过程为:在混合液中加入柠檬酸和三氯甲烷,离心收集水相,该水相即为初步预处理的多粘菌素B。
4.如权利要求1所述的多粘菌素B磁珠的制备方法,其特征在于,所述的表面经过羧基改性的Fe3O4纳米磁珠经过预处理后与多粘菌素B混合,Fe3O4纳米磁珠的预处理过程为:将表面经过羧基改性的Fe3O4纳米磁珠加入到分散液中,在25~40℃、100~500r/min下搅拌0.5~2h,洗涤,得到预处理后的Fe3O4纳米磁珠;
其中,分散液由柠檬酸和柠檬酸钠混合液与乙醇按照体积比为2:1的比例混合而成,柠檬酸和柠檬酸钠混合液的pH=4.8 6.6。
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5.如权利要求1或4所述的多粘菌素B磁珠的制备方法,其特征在于,所述40 60℃下搅~
拌速度为100~500r/min;所述NHS和EDC的总质量为Fe3O4纳米磁珠质量的2~5倍,且NHS与EDC的质量比为3:4。
6.如权利要求1所述的多粘菌素B磁珠的制备方法,其特征在于,预处理后的多粘菌素B与表面经过羧基改性的Fe3O4纳米磁珠的质量比为1:2。