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专利号: 201811589264X
申请人: 陕西师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物,所述亚种Herspirillum huttitense  5‑28于2017年4月10日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2017149。

2.权利要求书1所述的含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物的培养方法,其特征在于,包括下述步骤,

2.1菌株活化:将亚种Herspirillum huttitense  5‑28菌株接种到固体NA斜面培养基中,于34℃活化培养48h;

2.2种子液的制备:从所述步骤2.1中的固体NA斜面培养基上挑取亚种Herspirillum huttitense 5‑28单菌落,接种到液体培养基中,在34℃、180r/min的条件下培养12‑16h,得到种子液;

2.3发酵培养:将所述步骤2.2得到的种子液进行发酵培养,得到发酵液;

所述发酵培养的培养条件为:液体培养基,接种量3%,28‑37℃,180r/min,培养时间

48h。

3.如权利要求2所述的含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物的培养方法,其特征在于,在所述步骤2.2和所述步骤2.3中,所述液体培养基的配方相同,均为:每升无菌水中,葡萄糖10g,蛋黄卵磷脂0.2g,蛋黄卵磷脂用75%的乙醇溶解,CaCO3 5g,K2HPO4 0.2g,MgSO4·7H2O 0.2g,FeSO4·7H2O 0.002g,MnSO4·7H2O0.002g,NaCl 0.1g,KCl 

0.1g,氨苄青霉素75mg,pH 6.8‑7.2。

4.如权利要求1所述的含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物,其特征在于,所述细菌培养物中含有吲哚乙酸和水杨酸。

5.权利要求1所述的含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物在提高植物抗病性中的应用。

6.一种生物菌肥,其特征在于,所述生物菌肥是由权利要求1或权利要求2或权利要求3中所述的含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物为原料通过下述方法制备出来的:

6.1室温下配制包埋剂溶液(W/V),包含:海藻酸钠3%、聚乙烯醇2.5%、SiO2 3.5%和CaCO3 0.3%;高温高压灭菌20min,冷却至室温,得包埋剂溶液A;

6.2平板划线培养Lysobacter yanansis SNNU513,其保藏编号为CGMCC No.8375或ATCCBAA‑2621,和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株,分别挑取SNNU513和枯草芽孢杆菌菌株的单克隆菌落,并分别接种至250ml LB液体培养基中,在37℃,180r/min的条件下培养至对数期;

6.3将权利要求2或权利要求3所培养好的含有亚种Herspirillum huttitense 5‑28菌株的细菌培养物和所述步骤6.2活化好的SNNU513、枯草芽孢杆菌,按体积比5:3:2接种于LB液体培养基,在37℃,180r/min的培养条件下培养18‑20h,得到混合菌培养物B;

6.4将所述步骤6.1得到的包埋剂溶液A和所述步骤6.3得到的混合菌培养物B按质量比

5:2混合,恒温搅拌混匀,然后匀速加入到2.5%CaCl2交联剂溶液中,使滴入液形成2‑3mm的小球,交联24h,滤出颗粒,用无菌水洗涤,得包埋颗粒C;

6.5将所述步骤6.4得到的包埋颗粒C转移到LB液体培养基中,接种量40%,在34℃、

180r/min的条件下培养72h,得微生物菌剂D;

6.6将所述步骤6.5得到的微生物菌剂D恒温干燥至恒重,得到该生物菌肥。

7.权利要求6所述的生物菌肥在抗玉米青枯病、小麦纹枯病、附子根腐病中的应用。