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专利号: 2018112686725
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测阿尔茨海默症标志物的拉曼生物传感器,其特征在于,包括两条适配体DNA、金纳米粒子、均相反应液。

2.根据权利要求1所述的拉曼生物传感器,其特征在于,所述的两条适配体DNA序列分别是:PolyA10-Tau aptamer,其序列如SEQ ID No:1所示;

PolyA10-Aβ1-42 aptamer,其序列如SEQ ID No:2所示。

3.根据权利要求1所述的拉曼生物传感器,其特征在于,所述的均相反应液为:1*PBS、目标物以及事先标记好目标物对应的各自DNA适配体的AuNPs;所述的均相溶液中1*PBS 的NaCl终浓度为77.5 mM;所述的目标物为:tau蛋白或/和Aβ1-42低聚体。

4.一种权利要求1所述的拉曼生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将两条适配体DNA各自修饰到金纳米粒子表面;

(2)将修饰后的的纳米金粒子与均相反应溶液混合;

(3)拉曼强度分析。

5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(1)的具体操作步骤如下:S1 制备1 nM纳米金溶液,加入拉曼染料4-NTP和适配体DNA,混合均匀后,4 ℃下保存;

S2 搅拌条件下,按照1μL/min的速度将PB缓冲液滴加到步骤S1得到的溶液中,然后1μL/min的速度加入PBS缓冲液,加完后置于4℃保存;

S3 向步骤S2得到的溶液中加入灭菌水,离心,去除上清液;再加入灭菌水,离心,此过程重复两次,得到修饰后的纳米金浊液。

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中适配体DNA加入量为1 μM, 最终体系中的修饰好的纳米金浓度为0.3 nM,目标物tau蛋白的浓度为0 fM-10 nM,Aβ

1-42低聚体的浓度为0 nM-30 nM。

7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中PBS加入量为使其中PB的浓度为10 mM,NaCl浓度为0.3 M,最终体系中NaCl终浓度为77.5 mM。

8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述的S3中标记到纳米金上的DNA与AuNPs的摩尔比为150:1。

9.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(2)的过称为:将修饰后的纳米金溶液与均相溶液混合,37 ℃水浴下反应。

10.一种权利要求4制备的拉曼生物传感器在检测阿尔茨海默症标志物上的应用。