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专利号: 2018107068431
申请人: 深圳先进技术研究院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-08
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种miRNA-340靶基因结合序列,其特征在于,该序列包括:SEQIDNO:1、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7或SEQIDNO:19所示的核苷酸序列。

2.一种重组质粒,其特征在于,该重组质粒包括如权利要求1所述的miRNA-340靶基因结合序列。

3.根据权利要求2所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒从5’端至3’端依次包括如下元件:启动子序列、报告基因、如权利要求1所述的miRNA-340靶基因结合序列和终止序列。

4.根据权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,该重组质粒包括荧光素酶报告基因质粒pmir-GLO和所述miRNA-340靶基因结合序列,所述miRNA-340靶基因结合序列位于所述荧光素酶报告基因质粒的NheI酶切位点和XhoI酶切位点之间。

5.一种宿主细胞,其特征在于,该宿主细胞含有如权利要求2-4任一项所述的重组质粒。

6.一种筛选或鉴定IL-17负调控制剂的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:构建如权利要求4所述的重组质粒;

使测试试剂与所述重组质粒共转染真核细胞;

培养转染后的真核细胞,检测转染后的真核细胞分泌的荧光素酶活性;

其中,如果荧光素酶活性降低,则所述测试试剂被鉴定为IL-17负调控制剂。

7.根据权利要求6所述的筛选或鉴定IL-17负调控制剂的方法,其特征在于,所述真核细胞为酵母细胞、昆虫细胞、植物细胞、动物细胞或人细胞。

8.一种如权利要求4所述的重组质粒的构建方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:以小鼠基因组DNA为模板,以(i)SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示核苷酸序列或(ii)SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示核苷酸序列或(iii)SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示核苷酸序列或(iv)SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示核苷酸序列或(v)SEQ ID No.15和SEQ ID No.16所示核苷酸序列为引物,进行PCR扩增;

将PCR扩增所得序列连接至荧光素酶报告基因质粒pmir-GLO的多克隆位点。

9.权利要求1所述的miRNA-340靶基因结合序列或权利要求2至4任一项所述的重组质粒在检测miRNA-340对IL-17A基因调控作用中的应用。

10.权利要求1所述的miRNA-340靶基因结合序列或权利要求2至4任一项所述的重组质粒在研究miRNA-340对候选靶基因IL-17A生物学功能或调控机制中的应用。

11.权利要求1所述的miRNA-340靶基因结合序列或权利要求2至4任一项所述的重组质粒在靶基因为IL-17A的miRNA-340功能研究中的应用。