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专利号: 2018105856384
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.用于鉴定甘蓝根肿病抗性的分子标记CCR-SCAR1,CCR-SCAR1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.权利要求1所述分子标记的PCR特异性扩增引物对CCR1,CCR1的上游引物F-CCR1的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,CCR1的下游引物R-CCR1的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

3.用于鉴定甘蓝根肿病抗性的分子标记CCR-SCAR2,CCR-SCAR2的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

4.权利要求3所述分子标记的PCR特异性扩增引物对CCR2,CCR2的上游引物F-CCR2的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示,CCR2的下游引物R-CCR2的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

5.权利要求1或3所述分子标记、权利要求2或4所述引物应用于鉴定甘蓝根肿病抗性中的方法,所述方法包括如下步骤:(1)以待鉴定材料的基因组DNA为模板,利用引物对CCR1或引物对CCR2进行PCR扩增获得扩增产物;

(2)将扩增产物进行电泳分离,若存在401bp或355bp条带,则待鉴定材料具有根肿病抗性,若不存在条带,则待鉴定材料不具有根肿病抗性。

6.如权利要求5所述方法,其特征在于,利用引物对CCR1或引物对CCR2进行PCR扩增的反应体系如下所示:所述反应体系总体积25μL,其中模板(100ng/μL)3.0μL;引物对CCR1或CCR2(10μM)1.0μL;dNTP(100mM)0.5μL;Taq buffer 10×(Mg2+plus buffer)2.5μL;Taq DNA Polymerase(5U/μL)0.2μL;dd H2O补足25μL。

7.如权利要求6所述方法,其特征在于,利用引物对CCR1进行PCR扩增的程序为:95℃

3min,(95℃30s、62℃30s、72℃30s)循环7次,(95℃30s、58.5℃30s、72℃30s)循环22次,72℃10min,扩增完成后4℃保存。

8.如权利要求6所述方法,其特征在于,利用引物对CCR2进行PCR扩增的程序为:95℃

3min,(95℃30s,55℃30s,72℃30s)循环28次,72℃10min,扩增完成后保存在4℃条件下。

9.权利要求1所述分子标记CCR-SCAR1或/和权利要求2所述引物对CCR1在鉴定甘蓝根肿病抗性中的应用。

10.权利要求3所述分子标记CCR-SCAR2或/和权利要求4所述引物对CCR2在甘蓝根肿病抗性的鉴定及转育甘蓝根肿病抗性基因/位点到其他十字花科植物中的分子标记辅助鉴定筛选中的应用。