1.一种石杉碱乙衍生物的制备方法,所述石杉碱乙衍生物的结构如
所示,其特征在于,利用蛇足石杉内生真菌BjerkanderaadustaZJUT-HS8对石杉碱乙进行生物转化获得,具体方法是将蛇足石杉内生真菌BjerkanderaadustaZJUT-HS8接种至发酵培养基,同时加入石杉碱乙,在25-28℃、180rpm条件下发酵培养,取发酵液进行分离纯化,获得所述石杉碱乙衍生物;所述发酵培养基终浓度组成为碳源5-30g/L、氮源10-25g/L、无机盐1-5g/L,溶剂为水,pH值自然;所述碳源为葡萄糖;所述氮源为马铃薯浸出粉;所述无机盐为磷酸二氢钾;加入发酵培养基的石杉碱乙事先溶解于无水乙醇,浓度10mg/mL,并在无菌条件下经0.22μm微孔滤膜过滤,其在发酵液中的终浓度为0.03-0.2mg/mL;所述发酵液分离纯化方法为:(1)将发酵液过滤除去菌丝,用氨水调节发酵液pH至9-11,用氯仿萃取3次,合并有机层,减压浓缩至无液体流出,得氯仿萃取物;(2)将步骤(1)氯仿萃取物经硅胶柱层析分离,依次用体积比40∶1、20∶1、15∶1、8∶1、6∶1的氯仿-甲醇溶液洗脱,每个洗脱液洗脱2个柱体积,收集体积比8∶1的氯仿-甲醇溶液的流出液;(3)将步骤(2)收集的流出液浓缩至干,用ODSC18柱层析进行纯化,用体积比3∶1的甲醇-水溶液洗脱,薄层层析检测各个流出液,合并含目标组分的流出液,减压浓缩即得石杉碱乙衍生物。
2.如权利要求1所述石杉碱乙衍生物的制备方法,其特征在于,蛇足石杉内生真菌BjerkanderaadustaZJUT-HS8发酵液制备方法为:(1)将蛇足石杉内生真菌
BjerkanderaadustaZJUT-HS8接种至斜面培养基,在25-28℃培养5-7天,获得斜面菌体;所述斜面培养基终浓度组成为:葡萄糖10-30g/L,马铃薯浸出粉5-25g/L,KH2PO40.5-2g/L,琼脂10-20g/L,溶剂为水,pH值自然;(2)将斜面菌体接种至种子培养基,在25-28℃、180rpm、体积装液量30%条件下培养7天,获得种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖10-
50g/L,马铃薯浸出粉5-25g/L,KH2PO40.5-2g/L,溶剂为水,pH值自然;(3)将种子液以体积浓度5-10%的接种量接种至发酵培养基,同时在发酵培养基中加入石杉碱乙,在25-28℃、
180rpm、体积装液量30%条件下培养14天。