1.一种新型喹啉类生物硫醇荧光探针,其特征在于,所述新型喹啉类生物硫醇荧光探针为6-二甲胺基-2-甲基-4-喹啉基-2,4-二硝基苯磺酸酯,结构式如式(1):
2.一种如权利要求1所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的制备方法,包括以下步骤:(1)N,N-二甲基对苯二胺与乙酰乙酸乙酯发生缩合反应,得到6-二甲胺基-2-甲基-4(1H)-喹啉酮,结构式如式(2):(2)步骤(1)所得的6-二甲胺基-2-甲基-4(1H)-喹啉酮与2,4-二硝基苯磺酰氯发生磺酰化反应,得到式(1)所示的化合物。
3.根据权利要求2所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)的具体过程为:将N,N-二甲基对苯二胺、乙酰乙酸乙酯和冰醋酸溶于苯中,加热回流缩合反应30~
35h,用分水器分离反应中生成的水分,再将缩合反应液冷却至室温,减压蒸馏除去溶剂所得的粗产物,干燥后用二苯醚溶解,在氩气保护下,加热至245~250℃回流成环反应45~
50min,将成环反应液冷却至室温,再加入石油醚,过滤,所得过滤物为6-二甲胺基-2-甲基-
4(1H)-喹啉酮。
4.根据权利要求3所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的制备方法,其特征在于,所述N,N-二甲基对苯二胺和乙酰乙酸乙酯的摩尔比为1∶1.5~2。
5.根据权利要求2~4任一项所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)的具体过程为:将6-二甲胺基-2-甲基-4(1H)-喹啉酮、2,4-二硝基苯磺酰氯和三乙胺溶解于二氯甲烷中,在氩气保护下室温反应0.25~0.5h,反应完毕后,淬灭,二氯甲烷萃取,所得有机相经后处理,得到式(1)所示的化合物。
6.根据权利要求5所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的制备方法,其特征在于,所述后处理具体过程为:将所得有机相依次用蒸馏水和饱和食盐水洗涤,再用无水Na2SO4干燥,经减压蒸馏除去溶剂,所得粗产物用硅胶色谱柱提纯,得到式(1)所示的化合物。
7.根据权利要求6所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的制备方法,其特征在于,所述
6-二甲胺基-2-甲基-4(1H)-喹啉酮、2,4-二硝基苯磺酰氯和三乙胺的摩尔比为1∶1.1~1.4∶1.2~1.5,柱色谱分离洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚,所述乙酸乙酯与石油醚的体积比为1∶
4~2。
8.一种如权利要求1所述的新型喹啉类生物硫醇荧光探针或权利要求2~7任一项所述的制备方法制得的新型喹啉类生物硫醇荧光探针的应用,其特征在于,将所述新型喹啉类生物硫醇荧光探针与HEPES和乙腈的缓冲液混合,再加入待测溶液中,得到混合溶液,利用混合溶液的荧光变化来检测生物硫醇的存在与否。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述待测溶液中无生物硫醇时,所述混合溶液为无荧光发射;所述待测溶液中有生物硫醇时,所述混合溶液发出蓝色荧光。
10.根据权利要求8或9所述的应用,其特征在于,所述新型喹啉类生物硫醇荧光探针检测生物硫醇的检出浓度下限分别为:半胱氨酸为0.5μM,谷胱甘肽为0.6μM,同型半胱氨酸为
0.4μM。