1.一种双激发型荧光探针的制备方法,其特征在于,所述的荧光探针是Tb3+-dtpa-bis(fluorescein),其制备过程如下:
1)二乙三胺五乙酸、乙酸酐和吡啶,混合均匀于三颈烧瓶,在60-70 ℃下,缓慢搅拌加热22-25 h,冷却至室温,过滤,用乙酸酐和无水乙醚洗涤,抽滤,50 ℃真空干燥,得白色固体二乙三胺五乙酸二酐dtpaa;
2)二乙三胺五乙酸二酐、三乙胺、无水DMF和荧光素,混合均匀三颈烧瓶,于95-105 ℃下,搅拌加热22-25 h,静置,冷却到室温,过滤,50 ℃真空干燥,得淡黄色固体二乙三胺五乙酸-双荧光素dtpa-bis(2,6-fluorescein);
3)将二乙三胺五乙酸-双荧光素用10 mmol∙L-1, v/v = 9:1,pH=7.5的Tris-HCl/DMSO缓冲溶液溶解,得dtpa-bis(fluorescein)溶液,与Tb(NO3)3•6H2O混合,过滤,滤液于70-80℃下加热搅拌20-30 min或于室温下放置1 - 2天,得Tb3+-dtpa-bis(fluorescein)。
2.如权利要求1所述的双激发型荧光探针的制备方法,其特征在于:按摩尔比,二乙三胺五乙酸:乙酸酐:吡啶 = 1 : 4 : 6。
3.如权利要求1所述的双激发型荧光探针的制备方法,其特征在于:按摩尔比,二乙三胺五乙酸二酐:三乙胺: 荧光素= 1 : 3 :2。
4.如权利要求1所述的双激发型荧光探针的制备方法,其特征在于:按质量比,二乙三胺五乙酸-双(荧光素): Tb(NO3)3•6H2O = 1 : 0.45-0.5。
5.权利要求1所述的双激发型荧光探针Tb3+-dtpa-bis(fluorescein)在检测水样肼中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,方法如下:取水样,加入权利要求1所述的双激发型荧光探针TbШ-dtpa-bis(fluorescein),缓冲溶液浓度为10 mmol∙L-1, v/v = 9:1,pH=7.5的Tris-HCl/DMSO,搅拌均匀,在247 nm和500 nm的激发波长下观察荧光光谱的变化。
7.如权利要求5所述的应用,其特征在于,方法如下:取含肼水样0.5 mL于50 mL容量瓶中,加入5 mL 浓度为5.0 × 10-4 mol/L的权利要求1所述的双激发型荧光探针TbШ-dtpa-bis(fluorescein),缓冲溶液浓度为10 mmol∙L-1, v/v = 9:1,pH=7.4的Tris-HCl/DMSO,用缓冲溶液定容,在247 nm和500 nm的激发波长下观察荧光光谱的变化。