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专利号: 2017109163741
申请人: 湖北工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-10-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种天冬氨酸转氨酶,其特征在于:所述天冬氨酸转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种编码权利要求1所述的天冬氨酸转氨酶的基因,其特征在于:所述天冬氨酸转氨酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种制备权利要求1所述的天冬氨酸转氨酶的方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列;

2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中,构建天冬氨酸转氨酶的表达载体;

3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到天冬氨酸转氨酶蛋白;

所述步骤1)中,PCR技术扩增所用的引物为:正向引物如SEQ ID NO.3所示,反向引物如SEQ ID NO.4所示;

所述步骤2)中载体质粒为pET21a(+);

所述步骤3)中,大肠杆菌感受态菌体为大肠杆菌BL21感受态菌体;

所述步骤3)中,所述纯化蛋白过程中利用Ni-NTA亲和层析色谱柱进行蛋白纯化。