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专利号: 2017105858671
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.巴氏新小绥螨对阿维菌素抗性的分子标记,该分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

2.权利要求1所述分子标记在巴氏新小绥螨对阿维菌素敏感品系和抗性品系分类中的应用。

3.扩增权利要求1所述分子标记的特异性正反向引物,其特征在于:所述引物序列如下:

4F:5’-AAACGAAACGGGCTACTGT-3’;

4R:5’-CTTCTGCGTGGACTCGTTA-3’。

4.一种巴氏新小绥螨对阿维菌素抗性的分子标记的检测方法,其特征在于:先提取待测巴氏新小绥螨的总DNA,以总DNA为模板用权利要求3中的特异性正反向引物进行PCR扩增,得到包含突变区域的NbGluCl基因片段,将得到的基因片段与权利要求1中的巴氏新小绥螨对阿维菌素抗性的分子标记进行序列比对,即可判断该品系是对阿维菌素的敏感品系还是抗性品系。

5.根据权利要求4所述的巴氏新小绥螨对阿维菌素抗性的分子标记的检测方法,其特征在于:所述PCR体系为:PCR Master Mix 25μL,正反向引物各2μL,待测样本DNA模板50~

100ng,补充ddH2O至50μL。

6.根据权利要求4或5所述的巴氏新小绥螨对阿维菌素抗性的分子标记的检测方法,其特征在于:所述PCR扩增的程序为:94℃预变性3min;然后94℃变性30sec,58℃退火30sec,

72℃延伸1min,35个循环;最后72℃延伸5min。