1.一种酶响应型多功能纳米涂层的构建方法,其特征在于包括以下步骤:A) 316L不锈钢表面经抛光和清洗处理后,浸入浓度为2 mg/ml的多巴胺溶液中反应12小时,双蒸水超声清洗后,重复上述步骤2次,获得沉积有3层聚多巴胺涂层的表面,37℃烘干;
B) 将A)步骤中沉积聚多巴胺涂层的样品浸泡于0.1 0.5 mg/ml的亲和素溶液中,在37~℃条件下静置反应8 24小时,然后用双蒸水清洗样品,保存待用;
~
C)将浓度为10 20 mg/ml的生物素化肝素钠溶液与浓度为1 2 mg/ml的聚乙烯亚胺溶~ ~液等体积共混,室温下超声处理5分钟,得纳米颗粒悬液;
将B)步骤中获得的样品浸没于纳米颗粒悬液中,37℃条件下振荡反应8 24小时,然后~用双蒸水漂洗样品,保存待用;
D)将C)步骤中获得的样品浸没入1 3 mg/ml的亲和素溶液中,37℃条件下反应1 3小~ ~时;合成生物素化的酶响应型多肽,其结构为Biotin-PRQITAG-NH2;
将上述样品浸泡在10 50 μg/ml的多肽溶液中,37℃条件下反应1 3小时后,用双蒸水~ ~漂洗样品,保存待用;
E) 向浓度为100 500 ng/ml的SDF-1α溶液中滴加摩尔比为2:1:1的EDC/NHS/MES交联~剂溶液,混合均匀后立即将D)步骤中获得的样品浸泡其中,37℃条件下反应1 3小时后,用~双蒸水清洗样品,即得。
2.根据权利要求1所述的一种酶响应型多功能纳米涂层的构建方法,其特征在于:所述B)、C)、D)、E)步骤中的生物分子溶液,其溶剂均为磷酸盐缓冲液。
3.根据权利要求1所述的一种酶响应型多功能纳米涂层的构建方法,其特征在于:所述B)、C)、D)、E)步骤中,样品均在表面湿润条件下,在4℃的温度进行冷藏保存。
4.根据权利要求1所述的一种酶响应型多功能纳米涂层的构建方法,其特征在于:所述C)步骤中,聚乙烯亚胺的分子量在60 75 kDa的范围内。
~
5.根据权利要求1所述的一种酶响应型多功能纳米涂层的构建方法,其特征在于:所述E)步骤中,MES为0.05mol。
6.根据权利要求1所述的一种酶响应型多功能纳米涂层的构建方法,其特征在于:所述E)步骤中,EDC/NHS/MES交联剂溶液中,VSDF-1/V交联剂=10/1。