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专利号: 2017104635214
申请人: 南京晓庄学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:所述方法是直接由黑果枸杞的无菌种苗获得愈伤组织,再经组织培养培育得到黑果枸杞再生苗;具体包括如下步骤:(1)种子的消毒

选取黑果枸杞种子,依次经消毒剂消毒及无菌水冲洗后备用;

(2)无菌种苗的获得

将步骤(1)的种子置于MS-0培养基中,待所述种子萌发8~12天后得到无菌种苗;

所述MS-0培养基是通过向每升MS培养基中添加30g蔗糖和8.0g琼脂而得,所述MS-0培养基的pH值为5.0~5.5;

(3)愈伤组织的诱导

将步骤(2)的无菌种苗移栽至MS-1培养基中以诱导形成愈伤组织,培养条件为:温度23~27℃、光照12 h/d、培养基pH值为5.0~5.5,培养35 45天;

~

所述MS-1培养基是通过向每升MS培养基中添加0.5~1.0mgNAA、1.5~2.5 mg 6-BA、

30g蔗糖及8.0g琼脂而得;

(4)不定芽的获得

将步骤(3)的愈伤组织从外植体上剥离下来后置于MS-2培养基中以诱导分化不定芽,培养条件为:温度23~27℃、光照14 h/d、培养基pH值为5.0~5.5,增殖培养3 5代;

~

所述MS-2培养基是通过向每升MS培养基中添加0.5~1.0mgNAA、0.5~1.4 mg 6-BA、

30g蔗糖及6.0g琼脂而得;

(5)根的诱导

将步骤(4)的不定芽移栽到所述MS-0培养基中以诱导生根,即得黑果枸杞再生苗;

培养条件为:温度23~27℃、光照14 h/d、培养时间17 22天。

~

2.根据权利要求1所述的快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:步骤(1)中的消毒环节为,先用70v%的酒精浸泡3 7min,再用0.1wt%的氯化汞溶液消毒10 20min。

~ ~

3.根据权利要求2所述的快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于所述氯化汞溶液消毒的时间为15min。

4.根据权利要求1所述的快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:所述MS培养基的配制方法包括,将MS微量元素母液、MS肌醇母液、MS铁盐母液分别稀释100倍后与稀释了40倍的MS大量元素母液混合;

所述MS微量元素母液、MS肌醇母液、MS铁盐母液、MS大量元素母液的体积之比为5:5:5:

2;

所述MS大量元素母液的组成为,每升无菌水中含KNO3 76.0g、NH4NO3 66.0g、MgSO4•7H2O 

14.8 g、CaCl2•2H2O 17.6 g、无水CaCl2 13.28 g;

所述MS微量元素母液的组成为,每升无菌水中含MnSO4•H2O 2.23 g、ZnSO4•7H2O 0.86 g、H3BO3 0.62 g、KI 0.083 g、Na2MoO4•2H2O 0.025 g、CuSO4•5H2O 0.0025 g、CoCl2•6H2O 

0.0025 g;

所述MS肌醇母液的组成为,每升无菌水中含肌醇 10.0 g、烟酸 0.1 g、Vit B1 1.0 g、Vit B6 0.1 g;

所述MS铁盐母液的组成为,FeSO4•7H2O 2.78 g、Na2EDTA 3.73 g。

5.根据权利要求1所述的一种快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:所述MS-0培养基、MS-1培养基、MS-2培养基的pH值均为5.2。

6.根据权利要求1所述的一种快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:每升所述MS-1培养基中含 NAA 1.0mg、6-BA 2.0 mg。

7.根据权利要求1所述的一种快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:每升所述MS-2培养基中含 NAA 1.0mg、6-BA 1.0 mg。

8.根据权利要求1-7任一项所述的一种快速获得黑果枸杞再生苗的培育方法,其特征在于:还包括将步骤(5)得到的生根苗转入大棚内炼苗至少2周的步骤。