1.一种基于连续色谱技术同时提取分离甘草酸、甘草总黄酮的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)按甘草粉末:氨醇溶液为1g:6L的比例加入烧杯中,搅拌均匀后,将其倒入渗滤装置中,再按甘草粉末:氨醇溶液为1g:34L的比例向渗滤柱中加入氨醇溶液,设置流入速度为5-
10 ml/min,调节流出速度与流入速度一致,收集渗滤液,得甘草提取液;所述氨醇溶液为含
0.5%氨水、70%乙醇的氨醇水溶液;
(2)将甘草提取液上样至阴离子交换树脂D941色谱柱上进行吸附,收集上样流出液;再用体积分数为50-90%乙醇溶液洗脱吸附在色谱柱上的少量甘草总黄酮,洗脱流速为10-20 ml/min,收集乙醇洗脱液;合并上样流出液与乙醇洗脱液,将合并液旋蒸至溶液中不含有乙醇为止;
(3)再将旋蒸液上样至聚酰胺树脂色谱柱上进行吸附,用旋蒸液6倍体积量的70%乙醇溶液洗脱,收集甘草总黄酮乙醇洗脱液,再旋蒸干燥,得到甘草总黄酮,用芦丁比色法测定其纯度;
(4)再用0.25-0.75mol/L的 NaOH水溶液洗脱吸附在阴离子交换树脂色谱柱上的甘草酸,洗脱流速为5-10 ml/min,收集NaOH洗脱液;用1mol/L稀盐酸调节NaOH洗脱液pH 至7并旋蒸干燥,得到含盐甘草酸粗品;
(5)用纯甲醇溶解含盐甘草酸粗品,过滤除去盐分,收集滤液并旋蒸干燥,得到甘草酸粗品;用冰醋酸将甘草酸粗品重结晶,过滤得到甘草酸,用HPLC法测定其纯度;
该方法采用的生产装置为一个由12支色谱柱组成的在一个逻辑控制阀控制下的连续色谱分离系统,系统内的色谱柱分为四个区,分别为吸附区、甘草总黄酮解析区、甘草酸解析区和树脂再生区,每个区分别对应1个进口、1个出口,该生产装置共4个进口、4个出口;吸附区用于步骤(2)中甘草酸的吸附,甘草总黄酮解析区用于步骤(3)中甘草总黄酮的解析,甘草酸解析区用于步骤(4)中甘草酸的解析,树脂再生区用于阴离子树脂的再生。
2.根据权利要求1所述的一种基于连续色谱技术同时提取分离甘草酸、甘草总黄酮的方法,其特征在于:阴离子交换树脂色谱柱的上样流速为10—20 ml/min。