利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2020107100449
申请人: 山东省分析测试中心
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-22
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述分离方法包括以下步骤:向皂角刺中加入醇液回流提取获取皂角刺的醇提取物;依次采用石油醚、乙酸乙酯萃取所述醇提取物获得石油醚、乙酸乙酯及水萃取部分;将所述乙酸乙酯萃取部分通过高速逆流色谱进行分离,根据图谱收集洗脱液分离得到黄酮单体;

所述高速逆流色谱的分离溶剂系统为二氯甲烷‑甲醇‑正丁醇‑水,所述二氯甲烷:甲醇:正丁醇:水=4:3:0.5:2;

所述黄酮单体为李属素,异牡荆苷,3,3',5,5',7‑pentahydroflavanone,7,4'‑dihydroxy‑5,3'‑dimethoxyflavanonol及槲皮素;

所述醇液为乙醇的水溶液,其浓度大于等于90%;

所述高速逆流色谱转速为800~900rpm;

或,所述高速逆流色谱的流速为1.8~2.2mL/min;

所述根据图谱收集洗脱液分离得到黄酮单体的步骤如下:根据紫外检测收集高速逆流色谱洗脱液,将洗脱液进一步通过色谱分析得到单体成分;

依据紫外检测器在线监测,收集高速逆流色谱洗脱液,并将不同洗脱液进行减压干燥,将所得洗脱成分进行液相色谱分析,分离得到李属素,异牡荆苷,3,3',5,5',7‑pentahydroflavanone,7,4'‑dihydroxy‑5,3'‑dimethoxyflavanonol,槲皮素;

所述液相色谱流动相为乙腈(A)和0.1%甲酸‑水溶液(B)。

2.如权利要求1所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述乙醇溶液浓度为92~98%。

3.如权利要求1所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述醇提的固液比为1:2~4。

4.如权利要求3所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述固液比为1:3。

5.如权利要求1所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述醇提的次数为2~4次。

6.如权利要求5所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述醇提的次数为3次。

7.如权利要求6所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述三次醇提的时间分别为2h,1h,1h;将三次回流提取液合并后除去溶剂得到所述醇提取物。

8.如权利要求1所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述乙酸乙酯萃取部分通过高速逆流色谱分离的方式如下:溶剂系统为二氯甲烷:甲醇:正丁醇:水=4:3:0.5:2,上相为固定相,下相为流动相,高速逆流色谱仪柱体积为300mL,上样量

0.25g,分离柱转速为850rpm,流速2.0mL/min,检测波长280nm。

9.如权利要求1所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述液相色谱采用梯度洗脱方式。

10.如权利要求1所述基于逆流色谱分离皂角刺中黄酮单体的方法,其特征在于,所述利用高效液相色谱分析所得流份,液相条件:流动相采用乙腈(A)和0.1%甲酸‑水溶液(B)梯度洗脱,梯度条件如下:0‑5min,5%A‑10%A;5‑15min,10%A;15‑25min,10%A‑15%A;

25‑45min,15%A‑16%A;45‑55min,16%A‑18%A;55‑65min,18%A‑20%A;65‑70min,20%A‑25%A;70‑80min,25%A;80‑85min,25%A‑40%A;色谱柱为Waters‑C18,紫外检测波长为

280nm,柱温为25℃,流速为0.9mL/min,进样量为10μL。