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专利号: 2016101021042
申请人: 大连工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种海参卵肽钙螯合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1、海参卵预处理:将海参卵匀浆,沸水浴5~10min,得到海参卵匀浆液;

S2、向步骤S1制得的海参卵匀浆液中加入正己烷/无水乙醇混合液萃取脱脂,所述正己烷/无水乙醇混合液中正己烷与无水乙醇的体积比为2~3:1,所述海参卵匀浆液与所述正己烷/无水乙醇混合液的体积比为1:10~15,50℃萃取4~6h;

所述萃取脱脂过程重复1~2次;抽滤,所得滤饼自然风干、粉碎,得到海参卵脱脂粉,采用凯氏定氮仪测定蛋白含量;

S3、向步骤S2制得的海参卵脱脂粉加水至底物蛋白浓度为2~4g/100mL制得酶解反应液,按3000(U/g底物蛋白)的比例向所述酶解反应液中加入蛋白酶进行酶解反应,反应3~

6h;调pH至7.0,100℃灭酶10min,4000r/min离心20min,收集上清液,冷冻干燥即得海参卵酶解物;

S4、将步骤S3制得的海参卵酶解物与CaCl2溶液、磷酸盐缓冲液混合,得到螯合反应液,所述螯合反应液中酶解物终浓度为0.5mg/mL,CaCl2终浓度为5mmol/L,磷酸盐缓冲液终浓度为20mmol/L;将所述螯合反应液在模拟人体回肠条件下进行螯合反应1h后,5000×g离心

10min,取上清液经0.45μm水系微孔滤膜过滤后,冻干、粉碎即得海参卵肽钙螯合物;所述模拟回肠条件为控制反应液温度37℃、控制反应液pH为7.0。

2.根据权利要求1所述海参卵肽钙螯合物的制备方法,其特征在于,步骤S3所述蛋白酶为胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或风味蛋白酶中的一种。

3.根据权利要求2所述海参卵肽钙螯合物的制备方法,其特征在于,步骤S3所述蛋白酶为中性蛋白酶、风味蛋白酶或木瓜蛋白酶时,调节所述酶解反应液pH至7.0,温度为50℃;所述蛋白酶为碱性蛋白酶时,调节所述酶解反应液pH至8.5,温度为50℃;所述蛋白酶为胰蛋白酶时,调节所述酶解反应液pH至8.0,温度为37℃。

4.根据权利要求1所述海参卵肽钙螯合物的制备方法,其特征在于,步骤S4所述模拟回肠条件控制反应液pH的方法为采用pH计监测反应液pH,采用1mol/L的HCl溶液或1mol/L的NaOH溶液调整pH。