1.虹鳟鱼脂肪酸延长酶基因,命名为OmElo基因,其特征在于:核苷酸序列如SEQ ID No.1。
2.由权利要求1所述的OmElo基因指导编码的蛋白质,其特征在于:氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.包含核苷酸序列如SEQ ID No.1的重组载体或基因表达盒或转基因细胞系统或重组菌株。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于:表达框的启动子是BmNPV极早期启动子IE1。
5.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于:是以家蚕肌动蛋白3的启动子A3启动的加强型绿色荧光蛋白EGFP作为表达盒,加强型绿色荧光蛋白作为筛选标记,筛选标记后带有以IE1启动子启动优化后的OmElo基因的表达盒。
6.构建权利要求4所述的重组表达载体的方法,其特征在于:是将所述OmElo基因插入到出发载体pSL1180的多克隆位点得到中间载体,然后再将完整的含有OmElo基因的表达盒IE1-OmElo-SV40插入到最终载体pBac[A3-EGFP]得到重组表达载体。
7.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于:实施方案如下:
将OmElo基因连接于pUC57载体质粒;通过BamHⅠ/NotⅠ双酶切pUC57载体质粒,回收得到OmElo基因片段,将回收片段连接进相同酶切的pSL1180[Ser1-pGH-SV40]载体,得到pSL1180[Ser1-OmElo-SV40]载体;
PCR体外扩增,从BmNPV基因组中扩增IE1启动子序列,并在扩增片段上下游分别添加EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点,经T-A克隆进pMD19-T载体获得质粒;通过EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切所获得质粒,回收IE1启动子序列;
通过EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切pSL1180[Ser1-OmElo-SV40]载体,回收载体骨架,切除Ser1启动子,并与IE1启动子序列连接,获得中间载体pSL1180[IE1-OmElo-SV40];
通过AscⅠ单酶切pSL1180[IE1-OmElo-SV40],按试剂盒要求回收并补平黏性末端,制得表达盒片段IE1-OmElo-SV40;
通过BglⅡ单酶切pBac[A3-EGFP],按试剂盒要求回收载体骨架并补平去磷酸化,得到载体骨架;
将表达盒 片段IE1-OmElo-SV40与载体骨 架pBac[A3-EGFP]连接获得载 体pBac[A3-EGFP+IE1-OmElo-SV40]。
8.提高蚕蛹组织中11,14,17-顺-二十碳三烯酸含量的方法,其特征在于:将权利要求1所述的OmElo基因导入家蚕胚胎中,经筛选,得到目标家蚕转基因系。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:利用piggyBac重组表达载体将所述OmElo基因整合入家蚕基因组,所述重组表达载体是将含有所述OmElo基因的表达盒插入到载体pBac[A3-EGFP]的BglⅡ酶切位点得到。
10.权利要求4所述的重组表达载体在获得高11,14,17-顺-二十碳三烯酸含量家蚕转基因系中的应用。