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专利号: 2014106153848
申请人: 岭南师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:以微波辅助三聚氰酰氯活化聚乙二醇单甲醚mPEG为活化修饰剂,以龙舌兰麻超氧化物歧化酶SOD为修饰对象,制备修饰龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD,具体步骤如下:(1)mPEG修饰剂的制备:

量取50份质量mPEG、10份质量4A分子筛、10~20份质量无水碳酸钠和0.5~6份质量三聚氰酰氯,250~400mL有机溶剂,将量取的各种组份转入带回流装置的微波炉中进行微波辐射,反应完毕趁热抽滤,将上清液倾入500mL无水乙醚或石油醚中,于冰浴中冷却析出,抽滤,得活化mPEG粗产品沉淀;利用重结晶方法纯化粗产品,重复多次,抽干,直至

258nm紫外吸收光谱检测无吸收,所得沉淀经真空干燥,得活化mPEG修饰剂白色固态粉末;

(2)龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备:将龙舌兰麻SOD冻干粉和活化mPEG修饰剂,按1:10~1:80摩尔比溶解于400份碳酸盐缓冲溶液,室温振荡反应0.5~2.5小时,然后在反应液中加入100份冷甘氨酸终止反应,所得混合溶液用磷酸盐缓冲溶液PBS透析、浓缩,立即上预先平衡好的Sephadex葡聚糖凝胶层析柱洗脱分离,收集280nm第一峰,冷冻干燥得mPEG-SOD冻干粉。

2.根据权利要求1所述的一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:所述的微波辐射的功率为10~90%,辐射时间为3~40分钟。

3.根据权利要求1所述的一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤(1)所述有机溶剂为无水甲苯、丙酮或N,N-二甲基甲酰胺DMF。

4.根据权利要求1所述的一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤(1)所述的重结晶方法纯化粗产品具体方法为:在冰浴中,将粗产品溶解在有机溶剂DMF、甲苯或丙酮中,抽滤,去残渣,在所得滤液中加入无水乙醚或石油醚,搅拌,沉淀,抽滤,弃滤液,得沉淀。

5.据权利要求1所述的一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的碳酸盐缓冲溶液浓度为0.1mol/L,pH为9.0。

6.据权利要求1所述的一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的冷甘氨酸浓度为1mol/L。

7.据权利要求1所述的一种龙舌兰麻SOD修饰物mPEG-SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的透析用的磷酸盐缓冲溶液PBS的浓度为3~50mmol/L,pH为7~8。