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专利号: 2014106152949
申请人: 岭南师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种修饰龙舌兰麻SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:A.微波辅助活化单甲氧基聚乙二醇mPEG合成活化修饰剂:将100 120份质量mPEG,3 6份质量SA,80 120份质量DMF混合均匀得混合物;将混合物~ ~ ~置于微波炉回流装置中微波辐射,停止辐射待混合物冷却到室温,搅拌下加入无水乙醚或石油醚,使沉淀完全;抽滤,弃滤液留沉淀;搅拌下向所得沉淀中加入有机溶剂,直到沉淀完全溶解,抽滤,弃沉淀留滤液;在所得滤液中再加入无水乙醚或石油醚使其沉淀完全,抽滤,弃滤液留沉淀;重复上述操作3 5次,得到中间产物I:单甲氧基聚乙二醇琥珀酸酯mPEG-S;

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所述上述操作是指搅拌下向所得沉淀中加入有机溶剂,直到沉淀完全溶解,抽滤,弃沉淀留滤液;在所得滤液中再加入无水乙醚或石油醚使其沉淀完全,抽滤,弃滤液留沉淀;

在40 45℃下热浴,在中间产物I中加入3 5份质量NHS、80 120份质量DMF和5 8份质量~ ~ ~ ~二环己基碳二亚胺(DCC),混合均匀,取出,置于室温下过夜得到反应混合物;反应混合物再次置于40 45℃下热浴,直至混合物中的沉淀不再溶解为止;取出,趁热抽滤,弃滤渣留滤~液;向所得滤液滴加无水乙醚或石油醚使其沉淀完全,抽滤;所得沉淀用有机溶剂溶解后,加入无水乙醚或石油醚使其沉淀完全,抽滤;重复操作3 5次;最后将所得沉淀真空干燥,为~最终产物II:活化修饰剂单甲氧基聚乙二醇琥珀酸琥珀酰亚胺酯mPEG-SS;

B.mPEG-SS修饰龙舌兰麻SOD:

将龙舌兰麻SOD粉和mPEG-SS,按1:10~1:80摩尔比溶解于350 550份硼酸盐缓冲溶液,~室温振荡反应1~3小时,然后在反应液中加入100 150份体积的冷磷酸盐缓冲溶液PBS,终~止反应,所得混合溶液用PBS缓冲溶液透析、浓缩,立即上预先平衡好的Sephadex葡聚糖凝胶层析柱洗脱分离,收集280nm第一峰,冷冻干燥得修饰龙舌兰麻SOD冻干粉;

步骤A所述的有机溶剂为DMF、二氯甲烷、三氯甲烷或四氯化碳;

步骤B所述的冷磷酸盐缓冲溶液PBS的浓度为1mol/L ,pH值为7.0,温度为0 5℃。

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2.根据权利要求1所述的一种修饰龙舌兰麻SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤A所述的微波辐射的辐射功率为10 90%。

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3.根据权利要求1所述的一种修饰龙舌兰麻SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤A所述的微波辐射的辐射时间为3 60分钟。

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4.根据权利要求1所述的一种修饰龙舌兰麻SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤B所述的硼酸盐缓冲溶液的浓度为0.1mol/L ,pH为9.2。

5.根据权利要求1所述的一种修饰龙舌兰麻SOD冻干粉的制备方法,其特征在于:步骤B所述的透析用的PBS缓冲溶液的浓度为3~50mmol/L, pH为7~8。