1.一种霍山石斛近缘物种的种质鉴定方法,其特征在于:(1)提取待检样品的DNA:液氮充分研磨待检的新鲜样品,用CTAB法提取物种DNA;
(2)以Seq ID NO.3和4的序列为引物,利用所提取的DNA为模板,进行扩增PCR扩增;
得到如Seq ID NO.2所示扩增产物的,为霍山石斛。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,PCR反应体系特征为:制备20μlPCR反
2+
应体系,在200μlPCR管中加入如下量的物质:Taq酶0.2μl,dNTP 1.4μl,Mg 1.4μl,
10×PCR Buffer 2.0μl,引物2μM各2μl,已提取的DNA+水共11μl;
扩增程序条件为:95℃预变性5分钟,95℃变性45秒,60℃退火1分钟,68℃延伸4分钟,变性、退火、延伸三个步骤循环25次,最后再72℃充分延伸7分钟。