1.一种快速免疫组化双染试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含试剂A和试剂B,其中,所述试剂A是偶联FITC的双特异性纳米抗体A,所述双特异性纳米抗体A的氨基酸序列如SEQ ID No:3所示;所述试剂B是偶联TRITC的纳米抗体B,所述纳米抗体B的氨基酸序列如SEQ ID No:4所示。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述双特异性纳米抗体A由识别ER的纳米抗体A1和识别PR的纳米抗体A2通过linker连接而成,所述A1的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示,所述A2的氨基酸序列如SEQ ID No:2所示,所述linker的氨基酸序列如SEQ ID No:5所示;所述纳米抗体B识别HER2。
3.一种核酸,其特征在于,其编码如权利要求1所述的免疫组化双染试剂盒中的双特异性纳米抗体A。
4.一种核酸,其特征在于,其编码如权利要求1所述的免疫组化双染试剂盒中的纳米抗体B。
5.一种含有权利要求3或4所述核酸的重组载体或重组细胞。
6.如权利要求1所述的快速免疫组化双染试剂盒的制备方法,其特征在于,所述方法包括:(1)免疫羊驼制备文库,分别从纳米抗体文库中筛选结合ER、PR和HER2的纳米抗体;
(2)制备重组质粒和重组菌,表达、纯化获得纳米抗体A1、A2和纳米抗体B;
(3)筛选结合相应抗原的纳米抗体,以纳米抗体A1和A2用来构建双特异性抗体;
(4)设计linker,构建融合蛋白双特异性纳米抗体A,制备重组菌,表达、纯化;
(5)双特异性纳米抗体A偶联FITC制备试剂A,纳米抗体B偶联TRITC制备试剂B。
7.免疫组化双染试剂在制备用于检测乳腺癌的试剂盒中的用途,其特征在于,所述免疫组化双染试剂包含试剂A和试剂B,其中,所述试剂A是偶联FITC的双特异性纳米抗体A,所述双特异性纳米抗体A的氨基酸序列如SEQ ID No:3所示;所述试剂B是偶联TRITC的纳米抗体B,所述纳米抗体B的氨基酸序列如SEQ ID No:4所示。