1.一种靶向修饰的干细胞外泌体,其特征在于,所述外泌体包括以下要素:(1)外泌体表面通过马来酰亚胺‑巯基共价偶联靶向融合多肽,所述靶向融合多肽的氨基酸序列为EPLQLKM‑GGGGS‑DPPV;
(2)外泌体内部负载抗TrkA单克隆抗体,所述抗TrkA单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;
(3)所述外泌体来源于经抗氧化剂诱导培养的脐带间充质干细胞,其中抗氧化剂诱导为黄芩苷50μM、槲皮素20μM、N‑乙酰半胱氨酸5mM。
2.根据权利要求1所述的外泌体,其特征在于,所述外泌体的粒径为130.6±3.6nm。
3.根据权利要求1所述的外泌体,其特征在于,所述抗TrkA单克隆抗体为使用重组TrkA‑ECD蛋白免疫小鼠后经杂交瘤细胞融合与克隆筛选、抗体基因测序与表达和纯化后所得,其中重组TrkA‑ECD蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.一种制备如权利要求1所述外泌体的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)将脐带间充质干细胞在含50μM黄芩苷、20μM槲皮素、5mM N‑乙酰半胱氨酸的培养基中培养72小时,通过超速离心结合尺寸排阻层析纯化外泌体;
(2)将DSPE‑PEG2000‑Mal与靶向融合多肽按照摩尔比1:1.5的比例混合后在PBS中反应
4小时,获得偶联产物,与外泌体共孵育2小时完成表面修饰;
(3)通过电穿孔法将抗TrkA抗体负载至外泌体内部,其中电穿孔时电压150V、脉冲时间
10ms、脉冲次数3次。
5.一种如权利要求1所述外泌体在制备治疗糖尿病性或神经损伤性勃起功能障碍药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述药物通过静脉注射给药,每次注射100
10
μL,外泌体浓度为1×10 particles/mL,给药频率为每周2次,持续4周。