1.一种重组报告菌,其特征在于:由报告基因和DSF诱导型启动子以重组载体形式导入不产DSF菌株而成;所述DSF诱导型启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述不产DSF菌株为编码DSF群体感应系统的菌株中缺失DSF合成基因的突变体菌株;所述编码DSF群体感应系统的菌株包括黄单胞杆菌柑橘致病变种Xanthomonas citri subsp. citri或野油菜黄单胞菌野油菜致病变种Xanthomonas campestris pv. campestris。
2.根据权利要求1所述重组报告菌,其特征在于:所述报告基因为编码可被检测的蛋白质或酶的基因;所述酶的基因包括β‑葡萄糖苷酶编码基因或β‑半乳糖苷酶编码基因;所述β‑葡萄糖苷酶编码基因为gusA基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述重组载体为pBBR‑DSF诱导型启动子+报告基因;所述重组载体pBBR‑DSF诱导型启动子+报告基因是由DSF诱导型启动子与报告基因融合连接至pBBRMCS‑5载体而成;所述DSF合成基因包括rpfF;
所述不产DSF菌株是通过选用自杀性敲除载体,采用同源重组无痕敲除编码DSF群体感应系统的菌株中DSF合成基因而成。
3.一种如权利要求1或2所述重组报告菌的应用,其特征在于:将权利要求1或2所述重组报告菌用于检测待测菌株是否产生DSF或待测样品中是否含有DSF。
4.根据权利要求3所述重组报告菌的应用,其特征在于,所述检测的方法,包括以下步骤:
(1)将权利要求1或2所述重组报告菌接种于LB液体培养基中,进行培养,得重组报告菌培养菌液;将待测菌株接种于LB液体培养基中,进行培养后,离心,重悬,得待测菌株培养菌液;
(2)将步骤(1)所得重组报告菌培养菌液与显色底物混合加入无菌NYG固体培养基中,得DSF检测固体培养基;
(3)将步骤(1)所得待测菌株培养菌液直接接种或待测样品直接加入至步骤(2)所得DSF检测固体培养基上,进行恒温培养,观察菌落周围是否出现蓝圈:若菌落或样品周围出现蓝圈,则待测菌株产生DSF或待测样品中含有DSF;
若菌落或样品周围不出现蓝圈,则待测菌株不产生DSF或待测样品中不含有DSF。
5.根据权利要求4所述重组报告菌的应用,其特征在于:步骤(1)中,所述重组报告菌培养的条件为:在26~30 ℃,转速为160~200 rpm下,培养至OD600为1.2~1.8;所述待测菌株培养的条件为:在26~30 ℃,转速为160~200 rpm下,培养至OD600为1.0~2.2;所述离心的转速为4000~6000 rpm,时间为4~6 min;去掉离心后的上清液,补充等体积的无菌水重悬;步骤(2)中,所述重组报告菌培养菌液与显色底物的体积比为1:0.5~1.0;所述重组报告菌培养菌液与无菌NYG固体培养基的体积比为1:80~120;所述显色底物的浓度为15~25 mg/mL;所述显色底物为5‑溴‑4‑氯‑3‑吲哚‑β‑D‑葡萄糖醛酸环己胺盐溶液;所述无菌NYG固体培养基的温度为40~44 ℃,琼脂的浓度为1.2~1.8 w/v%;步骤(3)中,所述直接接种或加入的量为10~15 μL;所述恒温培养的温度为26~30 ℃,时间为18~50 h。