利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2025100458003
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1. 一种细胞色素P450氧化酶突变体,其特征在于,所述细胞色素P450氧化酶突变体为将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列按照下列突变形式之一进行突变得到:(1)第119位亮氨酸突变为丙氨酸或苯丙氨酸;

(2)第124位天冬酰胺突变为丙氨酸、脯氨酸或色氨酸;

(3)第119位亮氨酸突变为苯丙氨酸,第124位天冬酰胺突变为脯氨酸或色氨酸。

2.编码如权利要求1所述的细胞色素P450氧化酶突变体的基因。

3.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体含有如权利要求2所述的基因。

4.一种基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌含有如权利要求2所述的基因。

5.如权利要求1所述的细胞色素P450氧化酶突变体,或如权利要求3所述的重组载体,或如权利要求4所述的基因工程菌在催化阿维菌素B1a合成甲维盐中间体4"羰基‑5"羟基‑阿维菌素中的应用。

6.一种生产4"羰基‑5"羟基‑阿维菌素的方法,其特征在于,以阿维菌素B1a为底物、以权利要求1所述的细胞色素P450氧化酶突变体为催化剂组成反应体系,合成4"羰基‑5"羟基‑阿维菌素。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,反应的温度为25~30℃。

8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,反应体系中,将底物溶解于吐温40/DMSO混合液中,之后与催化剂混合进行反应;所述吐温40/DMSO混合液中吐温40与DMSO的体积比为

1:1。

9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,反应体系中,将细胞色素P450氧化酶突变体分散于缓冲溶液;所述缓冲溶液的pH为7.4 8.4;所述缓冲溶液为磷酸钾缓冲液、磷酸盐~缓冲液或Tris‑HCl缓冲液。