1.基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子,其特征在于,该前药分子具有如通式(I)所示的结构:在通式(I)中,a、b和c分别代表巯基化紫杉醇、肿瘤靶向肽、巯基化组氨酸接枝在聚酰胺‑胺树状大分子上的量,a、b和c之和与聚酰胺‑胺树状大分子表面的伯氨基总数相同;
其中,所述聚酰胺‑胺树状大分子记为PAMAM,巯基化紫杉醇记为PTX‑SH,肿瘤靶向肽记为c(RGDfC),巯基化组氨酸记为HIS‑SH。
2.如权利要求1所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子的制备方法,其特征在于,该制备方法包括:S1.将PAMAM进行马来酸酐化,得到第一改性树状大分子,记为M‑M;
S2.利用PTX‑SH对M‑M进行修饰,使M‑M具备疏水端,得到第二改性树状大分子,记为M‑MP;
S3.利用c(RGDfC)对M‑MP进行修饰,使M‑MP具备可靶向识别肿瘤细胞的亲水端,得到第三改性树状大分子,记为M‑MPR;
S4.利用HIS‑SH对M‑MPR进行修饰,使M‑MPR具备具有pH敏感性的亲水端,得到所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子,记为M‑MPRH。
3.根据权利要求2所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子的制备方法,其特征在于,所述S1具体包括如下步骤:S11.将PAMAM与马来酸酐以摩尔比为1:2~5的比例混合,使用二甲基亚砜进行溶解,室温下搅拌反应24h,得到第一反应液;
S12.对所述第一反应液进行透析,以第一透析液按每6~8h更换一次的频率透析2次后,以第二透析液按每2h更换一次的频率透析2次后结束透析,将所得透析液取出后冷冻干燥,得到所述M‑M;其中,第一透析液为pH=9的硼酸‑硼砂缓冲溶液,第二透析液为水;
可选的,所述S12中,透析所用的透析袋截留分子量为1500~7000。
4.根据权利要求2所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子的制备方法,其特征在于,所述S2具体包括如下步骤:S21.将3,3’‑二硫代二丙酸与紫杉醇溶于二氯甲烷中,室温搅拌1h后,再加入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和4‑二甲氨基吡啶,室温回流反应48h;反应结束后,再进行柱层析纯化并收集产物,得到二硫代二丙酸酯化紫杉醇,记为PTX‑S‑S‑PTX;
S22.将PTX‑S‑S‑PTX和二硫苏糖醇共同溶解于二氯甲烷中,室温搅拌1h后再加入三乙胺,并于N2氛围下搅拌反应12h;反应结束后收集有机相,再进行洗涤、干燥、浓缩的处理后,使用石油醚沉淀后离心收集产物,得到所述PTX‑SH;
S23.将所述M‑M和PTX‑SH以摩尔比1:1~15的比例混合,溶解于甲醇后,N2保护下室温搅拌反应24~48h,得到第二反应液;以透析介质为甲醇、按每6h更换一次的频率对所述第二反应液进行透析,透析3‑6次后收集透析液,真空干燥,得到所述M‑MP;
可选的,所述S23中,透析所用的透析袋截留分子量为2000~7000。
5.根据权利要求2所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子的制备方法,其特征在于,所述S3具体包括如下步骤:将所述M‑MP与c(RGDfC)以摩尔比1:1~10的比例混合,溶解于甲醇与水体积比为10:1的混合溶剂中后,N2保护下室温搅拌反应24h,得到第三反应液;以透析介质为甲醇、按每6h更换一次的频率对所述第三反应液进行透析,透析4次后收集透析液,真空干燥,得到所述M‑MPR;
可选的,S3中,透析所用的透析袋截留分子量为2000~7000。
6.根据权利要求2所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子的制备方法,其特征在于,所述S4具体包括如下步骤:S41.将巯基乙胺盐酸盐与三苯基氯甲烷混合,使用三氟乙酸进行溶解,室温搅拌反应
2h,得到第四反应液;对所述第四反应液进行旋蒸、洗涤,收集有机相后干燥浓缩,得到2‑(三苯甲硫基)乙胺;
α τ
S42.将N‑N ‑三苯基甲基组氨酸、1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐及N‑羟基丁二酰亚胺混合后使用二氯甲烷溶解,然后加入三乙胺,室温搅拌2h后,再加入所述2‑(三苯甲硫基)乙胺,室温搅拌反应12h;反应结束后,过滤白色固体副产物后收集滤液,旋蒸α浓缩后使用柱层析纯化,收集产物后真空干燥,得到N’‑(2‑(三苯甲硫基)乙基)‑N‑叔丁氧τ羰基‑N‑三苯基甲基组胺酰胺;
α τ
S43.将N’‑(2‑(三苯甲硫基)乙基)‑N ‑叔丁氧羰基‑N ‑三苯基甲基组胺酰胺与三异丙基硅烷混合,加入三氟乙酸后冰浴搅拌2h,反应结束后旋蒸除去大部分三氟乙酸,随后利用冷乙醚沉淀,离心后将沉淀加水溶解后滤去不溶物,将滤液冷冻干燥,得到所述HIS‑SH;
S44.将所述M‑MPR和HIS‑SH以摩尔比1:1~30的比例混合,溶解于甲醇后,N2保护下室温搅拌反应24~48h,得到第五反应液;以透析介质为甲醇、按每6h更换一次的频率对所述第五反应液进行透析,透析3‑6次后收集透析液,真空干燥,得到所述M‑MPRH;
可选的,所述S44中,透析所用的透析袋截留分子量为2000~7000。
7.如权利要求1所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子在纳米药物递送系统领域中的应用。
8.一种纳米载药胶束,其特征在于,该纳米载药胶束包括如权利要求1所述的基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子包载疏水性抗癌药物。
9.如权利要求8所述的纳米载药胶束的制备方法,其特征在于,该制备方法包括以PAMAM为载体,疏水性抗肿瘤药物PTX‑SH作为疏水端,可特异性识别肿瘤细胞过表达的αVβ3整合素的c(RGDfC)和具有pH敏感性的HIS‑SH作为亲水端,自组装形成所述基于两性离子化聚酰胺‑胺树状大分子的前药分子之后,物理包埋另一种疏水性抗癌药物,得到所述纳米载药胶束。
10.根据权利要求9所述的纳米载药胶束的制备方法,其特征在于,该制备方法包括:S5.以M‑MPRH包载疏水性抗癌药物制备所述纳米载药胶束;
所述S5具体包括如下步骤:
S51.将疏水性抗癌药物溶解于甲醇中,配制为疏水性抗癌药物甲醇溶液;
S52.将M‑MPRH溶解于甲醇中,配制为M‑MPRH甲醇溶液;
S53.将M‑MPRH甲醇溶液与疏水性抗癌药物甲醇溶液以质量比5~20:1的比例混合,室温避光搅拌2~6h,得到第六反应液;
S54.将第六反应液缓慢滴入水中进行透析,透析介质为水,每6h更换一次的频率透析3次,透析结束后收集透析液,得到所述纳米载药胶束;
可选的,所述S52中,疏水性抗癌药物包括阿霉素、喜树碱、氟尿嘧啶、二氢卟吩e6中的至少一种;
可选的,所述S54中,反应液与水质量比为1:0.5~3,向水中的滴加速度为0.5~1mL/min。