1.一种基于双乳液体系的高通量筛选高产脱落酸的灰葡萄孢霉菌株的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:S1、建立微生物突变体库,构建微流控双乳液芯片;
S2、利用微流控双乳液芯片对所述微生物突变体库中的菌株进行包埋形成双乳液液滴,其中,所述液滴的内相含有所述微生物突变体库菌株的培养液与具有生物相容性的溶液的混合物,中间相含有能够特异性结合目标产物的靶标结合元件、光引发剂和凝胶剂,外相为含有表面活性剂的氟化油,所述内相的流速为0.1‑0.2mL/h,所述中间相的流速为0.2‑
0.4mL/h,所述外相的流速为1‑3mL/h,所述具有生物相容性的溶液选自甲基纤维素水溶液、纤维素纳米晶水溶液、聚氧乙烯聚烯醚嵌段共聚物F108水溶液和聚乙烯醇PVA水溶液中至少一种;
S3、将所述双乳液液滴固化成核壳微球后进行培养,利用所述微球中靶标结合元件与目标产物结合形成指示信号,以对所述微球进行微流控分选;
所述靶标结合元件为与荧光团和猝灭剂对连接的适配体,荧光团和猝灭剂对是核酸染料和荧光杂交探针,所述目标产物脱落酸的适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中所述建立微生物突变体库采用紫外辐照、等离子体诱变、基因改造和化学诱变中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤S1中所述微流控双乳液芯片包括载玻片和固定在所述载玻片上的玻璃毛细管组件,所述玻璃毛细管组件包括外相毛细管、中间相毛细管和内相毛细管,所述内相毛细管的一端嵌套在所述中间相毛细管的一端内,所述中间相毛细管远离所述内相毛细管的一端嵌套在所述外相毛细管中,所述外相毛细管与所述中间相毛细管的连接处与外相进样针密封连接,所述中间相毛细管与所述内相毛细管的连接处与中间相进样针密封连接,所述内相毛细管上设置有内相进样针;
所述外相毛细管的内径为300‑500μm,所述中间相毛细管的内径为150‑200μm,所述内相毛细管的内径为40‑70μm。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤S2中所述微生物突变体库菌株的培养液与所述具有生物相容性的溶液两者的体积比为0.5‑1:100。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤S2中所述靶标结合元件以浓度为
4‑6μM的溶液形式加入所述中间相中,所述靶标结合元件的溶液与所述内相中微生物突变体库菌株的培养液两者的体积比为1:5‑10。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤S2中所述光引发剂为苯基(2,4,6‑三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐,所述凝胶剂为甲基丙烯酸酐化明胶和/或海藻酸钙水凝胶;
所述中间相中光引发剂的浓度为0.5‑1重量%、凝胶剂的浓度为4‑10重量%;
步骤S3中所述固化的过程包括:利用紫外光照射30‑50s。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤S2中所述表面活性剂选自Pico‑Surfin FC40、FS‑Kryjeff D900、EA表面活性剂和FS‑008中的至少一种;
所述氟化油中表面活性剂的浓度为2‑5重量%。
8.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤S3中所述培养的条件至少包括:温度为20‑30℃,时间为6‑8天;
所述微流控分选的过程包括:利用靶标结合元件与培养后核壳微球中的目标产物结合形成荧光信号,分选出荧光强度高于特定阈值的微粒。