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专利号: 2024106993717
申请人: 杏林医学科技(江苏)有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:授权未缴费
更新日期:2024-12-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组I型人胶原蛋白的制备方法,其特征在于,包括:配制相同浓度的人Ⅰ型前胶原氨基端肽的溶液和交联肽的溶液,所述人Ⅰ型前胶原氨基端肽如SEQ ID NO.1所示,所述交联肽如SEQ ID NO.2所示;

将所述人Ⅰ型前胶原氨基端肽的溶液与所述交联肽的溶液以(1 2):(1 4)的体积比混~ ~合;

添加谷氨酰胺酶5 40 U/g蛋白质;

~

充分混匀后,置于50℃反应0.5 6 h;

~

反应结束后,取出样品,置于沸水浴中灭酶,冷却至室温;

调节溶液pH调至4.6,使修饰产物沉淀并除去未混合交联的交联肽,10000×g离心15 min,弃去上清液;

用pH 4.6的水清洗沉淀,所得沉淀为重组I型人胶原蛋白。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述人Ⅰ型前胶原氨基端肽的溶液与所述交联肽的溶液以1:1、1:2、1:3、1:4或2:1的体积比混合。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述谷氨酰胺酶的添加量为5U/g、

10U/g、20U/g、30U/g或40U/g蛋白质。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述反应时间为0.5h、1h、2h、4h或6h。

5.一种复合水凝胶的制备方法,其特征在于,包括:于0 ℃的冰浴下,配制含50g/L 1,5‑二氮杂双环[4.3.0]‑5‑壬烯和50g/L 乙酰丙酸的离子液体;

于100 ℃油浴锅机械搅拌下,向所述离子液体中同时加入纳米纤维素和权利要求1所述的制备方法制得的重组I型人胶原蛋白中,快速搅拌混合物,充分溶解;

取反应物置于培养皿中,常温下静置 1 d,再使用无水乙醇反复清洗。

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述纳米纤维素的终浓度为1.25g/L,所述重组I型人胶原蛋白的终浓度为1.25g/L。

7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述纳米纤维素的直径为4 10nm,长~度为200nm。

8.权利要求1所述的方法制得的重组I型人胶原蛋白。

9.权利要求1所述的方法制得的重组I型人胶原蛋白在制备皮肤组织修复材料中的应用。

10.权利要求1所述的方法制得的重组I型人胶原蛋白在制备生物学填充材料中的应用。