利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2024103932162
申请人: 江苏海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种中药复方五神汤的质量检测方法,其特征在于:中药复方五神汤由金银花、紫花地丁、茯苓、车前子和牛膝五味药材组成,具体检测方法如下:S1:用 UPLC‑Q‑Exactive Orbitrap‑MS/MS 分析方法分别对金银花、紫花地丁、茯苓、车前子和牛膝五味药材进行定性分析;

S2:利用紫外分光光度法检测五神汤中总黄酮和总酚酸的含量;

S1中对五神汤中金银花90g、紫花地丁30g、茯苓30g、车前子30g和牛膝15g五味药材进行定性分析,包括以下过程:第一步:色谱与质谱条件;

第二步:混合对照品溶液的制备:

分别取芦丁、没食子酸、原儿茶酸、奎尼酸、杨梅素、京尼平苷酸、咖啡酸、木犀草苷、绿原酸、槲皮素、秦皮乙素、秦皮甲素、毛蕊花糖苷、β‑蜕皮甾酮对照品适量,置于棕色容量瓶中,用80%的甲醇溶解稀释,并定容至25mL,制备成200μg/mL的对照品储备液,取各对照品储备液适量,稀释成5μg/mL的混合对照品溶液;

第三步:供试品溶液的制备:

按处方称取五神汤中药饮片39g,加入25倍量水,浸泡60min,提取105min,提取3次,合并续滤液,旋蒸仪减压浓缩,温度60℃,至250mL;精密移取0.5mL浓缩液,置于10mL容量瓶中,用蒸馏水稀释并定容至刻度,摇匀,即得五神汤供试品溶液7.8mg/mL;

确定色谱‑质谱条件后,取混合对照品溶液及供试品溶液适量,过0.22μm微孔滤膜,导入UPLC‑Q‑Exactive Orbitrap‑MS/MS色谱‑质谱联用仪进行检测,可基于对照品的色谱峰与质谱数据对五神汤中的化合物进行准确鉴定,通过与天然化合物数据库的分子离子、二级碎片离子比对,推测其它化合物。

2.根据权利要求1所述的一种中药复方五神汤的质量检测方法,其特征在于:S2中总黄酮显色方法为分别加入0.3mL 5% NaNO2溶液,摇匀放置6min,再加入0.3mL 10% Al(NO3)3,摇匀放置6min,最后加入4.0 mL 4% NaOH,蒸馏水定容至10mL,摇匀放置10min;总酚酸显色方法为分别加入3mL福林试剂,摇匀放置3min,再加入4mL 7.5% Na2CO3,蒸馏水定容至10mL,暗处放置显色1h,以蒸馏水作为空白;在400~900nm波长范围内进行全扫描,分别测得其最大吸收在510nm、783nm处。

3.根据权利要求1所述的一种中药复方五神汤的质量检测方法,其特征在于:色谱‑质谱联用方法,其色谱柱为Shim‑pack XR‑ODS C18,以乙腈流动相B‑水流动相A为流动相,流速为0.5mL/min,柱温30℃,进样量为5μL,进行梯度洗脱;离子化模式:HESI‑II离子源,正、负离子模式;离子源温度550℃;气帘气CUR:206.84kPa;雾化气gas1和辅助气gas2为高纯度氮气,均为379.21kPa;一级质谱母离子扫描范围为m/z50~900,二级质谱扫描范围为m/z50~

800。

4.根据权利要求3所述的一种中药复方五神汤的质量检测方法,其特征在于:所述梯度洗脱具体为,0.01 4min时,流动相B由2%升至8%;4 5min时,流动相B由8%升至10%;5 9min~ ~ ~时,流动相B由10%升至17%;9 12min时,流动相B由17%升至20%;12 16min时,流动相B由20%~ ~降至23%;16 16.5min时,流动相B由23%降至2%;16.5 21min时,流动相B保持2%。

~ ~

5.根据权利要求1所述的一种中药复方五神汤的质量检测方法,其特征在于:五神汤每

1g样品以总黄酮计,有44.38mg;以总酚酸计,有11.83mg。