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专利号: 2023117100754
申请人: 江苏农牧科技职业学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-22
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种蓝羊茅愈伤组织诱导和分化再生的方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1:种子预处理:去除种子颖壳,消毒处理吸干水分后获得无菌种子;

S2:愈伤组织诱导:将S1获得的无菌种子接种愈伤组织诱导培养基,诱导愈伤组织,其中,愈伤组织诱导培养基为MS培养基+8 mg/L 2,4‑D+0.5mg/L NAA +30.0g/L蔗糖 + 8.0g/L琼脂;

S3:愈伤组织继代:将S2培养所得愈伤组织转入继代培养基进行继代培养,其中,继代培养基为MS培养基+4‑12 mg/L 2,4‑D+0.5mg/L NAA+30.0g/L蔗糖+20g/L甘露醇+8.0g/L琼脂;

S4:愈伤组织分化:将愈伤组织转至高渗培养基于25℃黑暗预培养15d,高渗培养基为MS培养基 + 4.0mg/L 2,4‑D +60.0g/L 蔗糖+8.0g/L琼脂, 选取组织呈结构致密、颗粒状、淡黄色的胚性愈伤组织,转入分化培养基进行分化培养,分化培养基为MS培养基+1‑3.0mg/L 6‑BA +0.1mg/L NAA+30.0g/L蔗糖+8.0g/L琼脂;

S5:生根和移栽:待S4培养的幼苗苗高达4‑5cm时,切下转移到生根培养基,待长出大量不定根时移栽;生根培养基为1/2MS培养基+0.5‑1.0mg/L NAA+30.0g/L蔗糖+8.0g/L琼脂;

所述S1中:将种子放置50%硫酸溶液中振荡浸泡25分钟,用蒸馏水洗涤后去除颖壳;消毒处理为:在50mL的次氯酸钠溶液中浸泡10min,用无菌水清洗后置于无菌滤纸吸干水分,用消毒后的无菌手术刀沿凹槽将种子纵切后备用。

2.根据权利要求1所述的一种蓝羊茅愈伤组织诱导和分化再生的方法,其特征在于,所述S2中培养条件为:温度25℃,黑暗,培养20d。

3.根据权利要求1所述的一种蓝羊茅愈伤组织诱导和分化再生的方法,其特征在于,所述S3培养条件为:温度25℃,黑暗,培养28d。

4.根据权利要求1所述的一种蓝羊茅愈伤组织诱导和分化再生的方法,其特征在于,所述S4分化培养期间的培养条件为:温度25℃,每天光培养16.0h,培养25d。

5.根据权利要求1所述的一种蓝羊茅愈伤组织诱导和分化再生的方法,其特征在于,所述S5培养条件为:温度25℃、光强2500‑3000lx、每天光培养10h,培养25‑30天。