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专利号: 2023114788851
申请人: 青岛西凯生物技术有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种具有高杀伤活性和高增殖能力的NK细胞,其特征在于,所述NK细胞按照如下的培养方法培养得到:(1)配置含有地衣多糖和天蚕素A的NK细胞培养基;

(2)使用NK细胞培养基将外周血单个核细胞重悬为细胞悬液;

(3)将细胞悬液接种到CD16包被的培养瓶中;

(4)置于37℃,5% CO2的细胞培养箱中进行培养,每3天补充NK细胞培养基,培养至13天,收集纯化,得到具有高杀伤活性和高增殖能力的NK细胞;

所述NK细胞培养基的成分为:

250 IU/mLIL‑2, 20ng/mLIL‑12,10% 自体血清,GT‑T551 H3无血清培养基,100μg /mL 地衣多糖,50μg /mL 天蚕素A;

6

所述细胞悬液的细胞含量为2.5×10/ml;

所述培养瓶的CD16包被浓度为10ng/mL;

所述高杀伤活性为对于肺癌细胞的杀伤活性。

2.一种具有免疫增强作用的药物,其特征在于,所述药物由NK细胞和药学上可接受的载体组成;

所述NK细胞由如下的培养方法如下:

(1)按照如下配方配置NK细胞培养基:250 IU/mLIL‑2, 20ng/mLIL‑12,100μg /mL 地衣多糖,50μg /mL 天蚕素A,10%自体血清,GT‑T551 H3无血清培养基;

6

(2)使用NK细胞培养基将外周血单个核细胞重悬为2.5×10/ml的细胞悬液;

(3)将每10mL的细胞悬液接种到10ng/mL CD16包被的培养瓶中;

(4)置于37℃,5% CO2的细胞培养箱中进行培养,每3天补充NK细胞培养基,培养至13天,收集纯化,得到NK细胞。

3.一种培养高杀伤活性和高增殖能力的NK细胞的培养方法,其特征在于,所述NK细胞的培养方法如权利要求2所述的培养方法所示。

4.一种用于提高NK细胞杀伤活性和NK细胞增殖能力的培养基,其特征在于,所述培养基按照如下配方配置:

250 IU/mLIL‑2, 20ng/mLIL‑12,100μg /mL 地衣多糖,50μg /mL 天蚕素A,10% 自体血清,GT‑T551 H3无血清培养基。

5.一种组合物在制备提高NK细胞杀伤活性的培养基中的应用,其特征在于,所述组合物由地衣多糖和天蚕素A组成,所述地衣多糖和天蚕素A的质量比例为2:1;

每1mL所述组合物中,地衣多糖和天蚕素A的含量为100μg和50μg。

6.根据权利要求5所述的应用,所述NK细胞杀伤活性为NK细胞对于肺癌细胞的杀伤活性。

7.一种组合物在制备提高NK细胞增殖能力的培养基中的应用,其特征在于,所述组合物由地衣多糖和天蚕素A组成,所述地衣多糖和天蚕素A的质量比例为2:1;

每1mL所述组合物中,地衣多糖和天蚕素A的含量为100μg和50μg。