1.一种魔芋种芋包衣剂,其特征在于,所述包衣剂成份为:生防菌、中药提取物、生长调节剂、诱抗剂和成膜剂;
所述生防菌为埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8;
所述中药提取物为和厚朴酚和/或厚朴酚。
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2.根据权利要求1所述的魔芋种芋包衣剂,其特征在于,微生物浓度在10 cfu/mL到
10
10 cfu/mL生防菌配合中药提取物5‑10g,生长调节剂30‑50mL,诱抗剂1‑3g,成膜剂500‑
2000mL;
所述生防菌为埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8;
所述中药提取物为和厚朴酚和/或厚朴酚。
3.根据权利要求1所述的魔芋种芋包衣剂,其特征在于,所述中药提取物为和厚朴酚。
4.根据权利要求1所述的魔芋种芋包衣剂,其特征在于,所述生长调节剂为0.01%芸苔素内酯,所述诱抗剂为鞭毛蛋白。
5.根据权利要求1所述的魔芋种芋包衣剂,其特征在于,所述成膜剂选自海藻酸钠、聚丙烯酰胺和羧甲基纤维素中的任意一种或两种。
6.根据权利要求1所述的魔芋种芋包衣剂,其特征在于,还包括填充剂,每1‑10L 7
10cfu/mL所述生防菌配合5‑6kg填充剂。
7.根据权利要求1所述的魔芋种芋包衣剂,其特征在于,所述填充剂选自硅藻土、生石灰、膨润土和高岭土中的一种。
8.一种魔芋种芋包衣剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8的制备;
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发酵培养:将埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8接种至发酵培养基中培养36‑48h,稀释成10cfu/mL的埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8的发酵液;
步骤2:中药提取物的加工,取中药提取物和厚朴酚和/或厚朴酚于少量无水乙醇中溶解;
步骤4:诱抗剂鞭毛蛋白的制备:
(1)解淀粉芽孢杆菌菌种活化;
(2)解淀粉芽孢杆菌菌种发酵;
(3)解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白沉淀;
(4)解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白纯化;
(5)解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白分析及保存;
步骤5:成膜剂的制备:
将海藻酸钠、聚丙烯酰胺、羧甲基纤维素中任意一种的配成10倍浓缩液,使充分溶胀后,备用;
步骤6:包衣剂的制备:
将上述制备好的埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8菌液、中药提取物溶液、0.01%芸苔素内酯、鞭毛蛋白、成膜剂浓缩液混合均匀,即得包衣剂。
9.一种魔芋种芋包衣剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8的制备;
发酵培养:将埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8接种至发酵培养基中,35℃,150r/min,培养36‑7
48h,稀释成10cfu/mL的埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8的发酵液;
发酵培养基的质量份比为:葡萄糖浓度30份、酵母浸粉9份、磷酸氢二钾1.5份、鱼粉10份、磷酸二氢钾1份、七水硫酸镁0.6份、水1000份,培养基的初始pH为6;
步骤2:中药提取物的加工:取中药提取物和厚朴酚和/或厚朴酚于少量无水乙醇中溶解;
步骤3:诱抗剂鞭毛蛋白的制备:
(1)解淀粉芽孢杆菌菌种活化:将解淀粉芽孢杆菌接种于LB固体培养基上,32℃培养
24h;
(2)解淀粉芽孢杆菌菌种发酵:将活化的解淀粉芽孢杆菌接种LB液体培养基中,32℃,
150r/min,培养72h后,4℃,4000rpm离心20min收集发酵液上清;
(3)解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白沉淀:将50%的硫酸铵溶液加至发酵液上清中,溶解后4℃沉淀过夜,4℃,10000rpm,离心20min收集解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白沉淀;
(4)解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白纯化:加入pH 7.4Tris HCl溶解蛋白沉淀,离心得蛋白上清液,放入透析袋截留7000Da蛋白,透析结束后,采用DEAE琼脂糖离子层析,分别用0.1,
0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7mol/LNaCl溶液各100mL进行洗脱,获得8个洗脱峰BP1‑BP8,收集第8个洗脱峰BP8,采用Sephadex G‑75葡聚糖凝胶过滤层析对BP8进行层析,洗脱液为pH7.4的Tris HCl,得到2个峰:BP8‑1,BP8‑2,收集第二个洗脱峰BP8‑2即为目标蛋白溶液;
(5)解淀粉芽孢杆菌鞭毛蛋白分析及保存:对收获的目标蛋白进行SDS‑PAGE,在35‑
40kDa出现蛋白条带,与鞭毛蛋白的大小一致,切下蛋白条带,将收集到的目标蛋白溶液冷冻干燥浓缩后得到鞭毛蛋白;
步骤4:成膜剂的制备:
将海藻酸钠、聚丙烯酰胺、羧甲基纤维素中任意一种的配成10倍浓缩液,使充分溶胀后,备用;
步骤5:包衣剂的制备:
将上述制备好的埃吉类芽孢杆菌SWL‑W8菌液、中药提取物溶液、0.01%芸苔素内酯、鞭毛蛋白、成膜剂浓缩液混合均匀,即得包衣剂。
10.一种魔芋种芋包衣剂的使用方法,其特征在于,将魔芋种芋放入权利要求1‑9任一项所述魔芋种芋包衣剂中充分浸润;
或将权利要求1‑9任一项所述魔芋种芋包衣剂均匀喷雾在魔芋种芋表面;
魔芋种芋表面覆盖魔芋种芋包衣剂后用填充剂包裹均匀,置于阴凉处晾干;所述填充剂选自硅藻土、膨润土和高岭土中的一种。