1.一种靶向毛囊的载药植物外泌体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)制备纳米级中草药悬浮液;
所述纳米级中草药悬浮液的制备方法为将中草药粉末与水混合,均质,离心,重悬,得到纳米级中草药悬浮液;
所述中草药粉末与水的体积比为1:(8 15);所述均质的压力为5000 10000psi,温度为~ ~
60 70℃,时间为30 180min;所述纳米级中草药悬浮液的浓度为10 1000mg/ml;
~ ~ ~
(2)制备植物外泌体;
所述植物外泌体为经过稳定性修饰的植物外泌体;所述稳定性修饰的方法为将植物外泌体依次进行脂肪酸修饰和聚乙二醇修饰;
所述脂肪酸修饰的方法为将脂肪酸羧酸与所述植物外泌体溶液和PBS溶液混合,得到脂肪酸修饰的植物外泌体;所述脂肪酸羧酸的浓度为0.1 10mM,所述植物外泌体溶液与所~述脂肪酸羧酸体积比为(8 12):1;所述PBS溶液的添加量为所述植物外泌体溶液和所述脂~肪酸羧酸总体积的0.5 2倍;
~
所述聚乙二醇修饰的方法为将聚乙二醇‑800与所述脂肪酸修饰的植物外泌体混合,得到植物外泌体交联体系;所述聚乙二醇‑800的原始浓度为30 50%,所述植物外泌体交联体~系中聚乙二醇‑800的终浓度为1.3 2.5%;
~
所述植物外泌体交联体系还加入海藻糖溶液,经超速离心后,重悬,得到所述经过稳定性修饰的植物外泌体;所述海藻糖溶液的原始浓度为20 30%;所述海藻糖加入植物外泌体~交联体系后的终浓度为10 15%;
~
(3)将所述纳米级中草药悬浮液与所述植物外泌体混合,得到负载药物的植物外泌体;
(4)用Wnt3a蛋白修饰所述负载药物的植物外泌体,得到所述靶向毛囊的载药植物外泌体;
所述用Wnt3a蛋白修饰的方法为:制备Wnt3a蛋白溶液,将所述负载药物的植物外泌体与Wnt3a蛋白溶液混合,洗涤,重悬,得到靶向毛囊的载药植物外泌体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述纳米级中草药悬浮液与所述植物外泌体的体积比为(0.5 2):(0.5 2)。
~ ~
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述Wnt3a蛋白溶液的浓度为10~
100ng/ml;所述负载药物的植物外泌体与Wnt3a蛋白溶液的体积比为(3 6):1;所述靶向毛~囊的载药植物外泌体的浓度为5 200mg/ml。
~
4.一种权利要求1 3任一项所述制备方法制得的靶向毛囊的载药植物外泌体。
~
5.一种权利要求4所述的靶向毛囊的载药植物外泌体在制备治疗白发药物中的应用。