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专利号: 202310994421X
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.粘液鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium mucilaginosum)ZJPH2023031,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期:2023年6月14日,保藏编号:CCTCC NO:M 20231019,地址:中国,武汉,武汉大学,邮编,430072。

2.一种权利要求1所述粘液鞘氨醇杆菌ZJPH2023031在拆分2‑氯丙酸消旋体制备(R)‑

2‑氯丙酸中的应用。

3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用的方法为:以粘液鞘氨醇杆菌ZJPH2023031经发酵培养获得的湿菌体为酶源,以2‑氯丙酸消旋体为拆分底物,pH 3.0‑

10.0的缓冲液为反应介质构成转化体系,在20‑40℃、180‑200rpm条件下进行反应,反应结束后,获得含(R)‑2‑氯丙酸的转化液,经分离纯化后获得(R)‑2‑氯丙酸产物。

4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的湿菌体用量以缓冲液体积计为50‑

600g/L;所述底物初始加入浓度以缓冲液体积计为50~120mM。

5.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述反应介质是pH为9.0,0.1M的甘氨酸‑氢氧化钠缓冲液。

6.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述反应在30℃,200rpm条件下反应24‑36h。

7.如权利要求3‑6之一所述的应用,其特征在于,所述反应介质为pH为9.0,0.1M的甘氨酸‑氢氧化钠缓冲液,所述的湿菌体用量以缓冲液体积计为70g/L,所述底物初始加入浓度以缓冲液体积计为80~90mM,反应条件为30℃,200rpm条件下反应24h。

8.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的酶源按如下方法获得:(1)平板培养:将粘液鞘氨醇杆菌ZJPH2023031接种于平板培养基上,30℃培养48‑72h,获得平板培养菌株;平板培养基组成为:葡萄糖15g/L,鱼粉蛋白胨20g/L,酵母浸膏10g/L,硫酸铵2g/L,磷酸二氢钾2g/L,氯化钠1g/L,七水硫酸镁0.5g/L,琼脂20g/L,溶剂为水,pH 

6.5;

(2)种子培养:将平板培养后的菌株挑取一环接种至种子培养基,于200rpm,30℃条件下培养12h,得到种子培养液;种子培养基组成为:葡萄糖15g/L,鱼粉蛋白胨20g/L,酵母浸膏10g/L,硫酸铵2g/L,磷酸二氢钾2g/L,氯化钠1g/L,七水硫酸镁0.5g/L,溶剂为水,pH 

6.5;

(3)发酵培养:将步骤(2)种子培养液以体积浓度10%的接种量接种至发酵培养基中,

200rpm,30℃培养24h,获得发酵液,将发酵液于9000rpm,4℃下离心10min,所得沉淀用

0.1M,pH 7.0的磷酸氢二钾‑磷酸二氢钾缓冲液洗涤,再次离心后获得所述湿菌体;发酵培养基组成为:葡萄糖20g/L,酵母浸膏8g/L,硫酸铵20g/L,氯化钠10mM,溶剂为水,pH 6.5。