1.一种体外培养家蚕追寄蝇的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1,蝇卵的收集处理:寄生传代成蝇羽化7天,室内温度28 ℃,在蝇笼内分别放入塑料薄膜、柞蚕蛹;2h取出,观察柞蚕蛹表面蝇卵密集程度;次日早上,收集蝇卵,将柞蚕蛹表面寄生卵取下;
步骤2,培养基制备:
首先,处理家蚕血淋巴:1)将五龄第六天菁松×皓月家蚕用纯水冲洗后,60 ℃水浴加热10 min;2)在无菌条件下,用酒精棉球擦拭上述家蚕体表,剪开家蚕第一对腹足,收集家蚕血淋巴;
脱脂牛奶30 ml,蔗糖0.9 g搅拌溶解为牛奶蔗糖溶液;酵母提取物2.7 g,灭菌水9.9 ml,搅拌溶解为酵母提取物溶液;将脱脂棉分成15 mg/个揉团;将上述溶液及脱脂棉放入
115 ℃高压灭菌10 min,晾凉后在超净台混合牛奶蔗糖溶液与酵母提取物溶液,将鸡蛋表面用75%酒精擦拭晾干,吸取5.4 mL鸡蛋黄加入刚制备好的混合液中,加入5.5 mL五龄第六天家蚕血淋巴,再加入工作浓度8 μg/mL的108.8 μL硫酸庆大霉素注射液后搅拌均匀,分装至24孔板内,每孔400 μL液体培养基+15 mg脱脂棉;
步骤3,蝇卵孵化培养:将步骤1所述蝇卵用镊子放入步骤2所述培养基内,每孔1颗蝇卵,盖盖后用封口膜密封后置于70%RH,26℃恒温箱,0L:24D培养,统计蝇卵化蛹情况及蝇蛆生长时间;
步骤4,蝇蛹收集处理:将步骤3中获得的蝇蛹统一收集于洁净平皿内,置于75% RH,26℃全黑暗放置,12‑13天后获得羽化成蝇,统计成蝇羽化率;
步骤5,羽化成蝇饲养:将步骤4获得的人工培养家蚕追寄蝇成蝇放于室内蝇笼,长×宽×高,35 cm×35 cm×35 cm,12 L: 12 D,26 ℃饲养,每日饲喂10%蜂蜜水。