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专利号: 2023103590033
申请人: 浙江理工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种胶原蛋白检测用电化学免疫传感器电极的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤1:对丝织品进行超声清洗并烘干,浸泡在饱和KCl溶液中活化,二次烘干后进行热处理碳化,冷却,得到含氮多孔伪石墨层结构碳三维骨架;

步骤2:取吡咯单体溶液进行蒸馏后加入十二烷基苯磺酸钠,得到混合液;

步骤3:以步骤1所得含氮多孔伪石墨层结构碳三维骨架为工作电极,铂片为对电极,Ag/AgCl电极为参比电极,以步骤2所得混合液为电解液,进行恒电位电化学沉积法制备C/PPy复合电极,后用无水乙醇和去离子水清洗并烘干;

步骤4:取氯金酸溶液加热沸腾后再滴入柠檬酸钠,搅拌均匀,得到酒红色的金纳米颗粒溶液;

步骤5:取步骤3所得C/PPy复合电极,滴加步骤4所得金纳米颗粒溶液,加热固定,得到C/PPy/AuNps;

步骤6:向C/PPy/AuNps滴加巯基丙酸溶液并加热结合;

步骤7:向步骤6所得电极滴加EDC和NHS的混合溶液,加热活化;

步骤8:取牛血清蛋白按1:90‑110的比例加至PBS缓冲液得到稀释液,再与抗体混合得到胶原蛋白单克隆抗体稀释液;

步骤9:将胶原蛋白单克隆抗体稀释液滴在活化电极表面,孵育后得到胶原蛋白检测用电化学免疫传感器电极。

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤1中:选用无水乙醇超声清洗20‑40min,活化温度为50‑70℃,活化时间为10‑14h;

热处理碳化为:以室温为起点,在空气中以5‑8℃/min升至280‑320℃,保温1.5‑2.5h,通入氮气并以2‑5℃/min升至850‑950℃,保温1.5‑2h,随炉自然冷却,得到含氮多孔伪石墨层结构碳材料。

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤2中:吡咯单体溶液的浓度为0.1‑

0.2M;十二烷基苯磺酸钠浓度为4‑6mM。

4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤3中:电位窗口设置为0.7‑0.9V;电化学沉积时间为400‑1000s。

5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤4中:氯金酸浓度为0.8‑1.2mM;柠檬酸钠浓度为0.08‑0.12M;搅拌时间为10‑20min。

6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤5中:加热固定温度为35‑40℃,时间为0.5‑1.5h。

7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤6中:巯基丙酸溶液的浓度为0.2‑0.4M;

金纳米颗粒溶液与巯基丙酸溶液的体积比为1:3‑5;

加热结合温度为35‑40℃,时间为0.5‑1.5。

8.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤7中:EDC与NHS摩尔比为1.8‑2.2:1,加热活化温度为35‑40℃,时间为0.5‑1.5h。

9.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤8中:牛血清蛋白与PBS缓冲液的重量比为1:80‑120;胶原蛋白单克隆抗体稀释液中抗体的浓度为2‑4mg/mL;

PBS缓冲液pH为7.4。

10.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤9中:孵育温度为35‑40℃,孵育时间0.5‑1.5h。