利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2021106915269
申请人: 浙江理工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种用于狐狸毛角蛋白检测的免疫传感器修饰电极的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

步骤1:银纳米粒子的制备:将30‑50 mL超纯水配制的0.01%‑0.05% AgNO3溶液装入锥形瓶中,搅拌加热,沸腾持续2‑4 min后迅速加入1‑1.5 mL质量分数为1%‑2%的柠檬酸钠溶液,继续搅拌加热至溶液变为淡黄色,继续加热5‑10 min后停止加热,搅拌使其冷却至室温, 获得的银纳米粒子;

步骤2:碳纳米管的制备:称取20‑40mg的多壁碳纳米管溶解于10‑20mLN,N‑二甲基甲酰胺溶液中,超声,制得黑色的多壁碳纳米管悬浮液;

步骤3:纳米CuO的制备:取硝酸铜溶液和碳酸钠溶液混匀,并超声分散0.5‑1h,在160℃‑200℃的温度下反应4h‑8h后,真空抽滤,将得到的粉末先后用去离子水、无水乙醇分别洗涤,最后在80℃‑100℃中干燥1.5h‑2h,得到纳米CuO;

步骤4:纳米CuO/碳纳米管复合物的制备:将等量纳米CuO加入多壁碳纳米管悬浮液中,超声5‑6h,使其充分分散,得到纳米CuO/碳纳米管复合物;

步骤5:称取纳米级氧化铝,沿着8字形将玻碳电极在麂皮用15‑25 nm氧化铝悬浮浆打磨8‑15 min,然后分别用蒸馏水,无水乙醇、蒸馏水各自超声清洗,确保电极表面洁净后即可开始自组装过程;

步骤6:取3‑5ul 银纳米粒子悬浮液垂直涂滴在GCE电极表面,35‑40℃恒温箱中烘干得到纳米银修饰的GCE电极;继续涂滴3‑5ul的纳米CuO/碳纳米管复合物,35‑40℃恒温箱中烘干,即制得AgNPs/碳纳米管/CuO GCE电极;

步骤7:将电极置于0.04‑0.06 mol/L 3‑羟基丙酸水溶液,并于35‑37℃下恒温箱反应

1.5‑2h;将修饰有3‑羟基丙酸的电极在含有0.04‑0.06mol/L EDC、0.02‑0.04mol/L NHS缓冲液中并置于35‑37℃下恒温箱孵育0.5‑1h,将3‑羟基丙酸的末端羧基转化为活性NHS酯;

再取5‑7ul 5‑10ug/mL狐狸毛角蛋白特异性抗体溶液,滴涂至电极表面,35‑37℃下恒温箱中烘干,用PBS缓冲液洗净未固定的抗体,得抗体/AgNPs/碳纳米管/CuO GCE修饰电极;随后,用BSA溶液封闭30‑40min,以封闭电极表面可能存在的非特异性结合位点,取出后用PBS缓冲液洗净,晾干,得免疫传感器修饰电极。

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1中,获得的银纳米粒子放置在4℃环境中贮存,备用。

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤2中,超声时间为0.5‑1h。

4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤3中,硝酸铜溶液和碳酸钠溶液的体积比是1:1。

5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤4中,超声时间为5‑6h。

6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤5中,用无水乙醇浸泡超声清洗8‑

12min;用去离子水超声清洗8‑12min。

7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤7中,所述BSA溶液的浓度为0.8‑

1.2wt%。